1． 范围

本标准适用于测定白柳(whit willow , Salix alba L.)皮中水杨苷(salicin)的含量。

2．原理

由于水杨甙在紫外区有吸收，通过选择该物质的最大吸收波长，以获得最大的灵敏度

和抗干扰能力，选择合适的洗脱剂，以测定柱洗脱液在流动池中吸收紫外光的大小来确定其含量。

3．试剂

3.1 重蒸水

3.2 乙腈（色谱纯）

3.3 甲醇（分析纯）

3.4 甲醇（色谱纯）

3.5 磷酸（分析纯）

3.6水杨苷(salicin  C₁₃H₁₈O₇ ; 286.27  )对照品

4．仪器

4.1 高效液相色谱仪（具色谱工作站和UV检测器）

4.2 分析天平（1/10000）

4.3 超声波清洗仪

4.4  0.45 mm 微孔膜过滤器

4.5 容量瓶

4.6 具塞样品瓶

4.7 色谱柱 Kromasil C18-5m  200×0.46

5．分析步骤

5.1标样制备  精密称取标样用水:甲醇=1:1(V/V)溶解，使其浓度为0.6mg/ml，过0.45mm滤膜，置冰箱贮存。

5.2 待测样品供试液

精确称取60mg提取物于25ml容量瓶中，用水：甲醇=1:1(超声溶解，冷却定容，0.45 mm微孔滤膜过滤为供试液。

5.3 色谱条件

流动相  A：0.01%磷酸水溶液  B：甲醇:乙腈=1:1

A : B = 90 : 10 ( V / V ，等梯度)

流速   0.8ml/min

进样量：  10ml

波长：  269nm

柱温： 30℃

5.4  样品的测定：

精确吸取待测样品供试液与对照品供试液各10ml，注入液相色谱仪，得出峰面积。

5.5  计算：

根据样品与对照品各峰峰面积之比比较各种成份的含量

水杨苷  长沙上禾生物  6-98%

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上禾生物是一家专业的标准化植物提取物生产企业。

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