和厚朴酚在帕金森病小鼠模型中的神经保护作用 |
发布时间:2015-09-29 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:2134 |
帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种常见的中 老年神经系统疾病,病因尚不明确。和厚朴酚(honoki— ol,HL)是从中药厚朴中提取的含酚羟基的生物活性 物质,具有清除自由基、保护神经细胞损伤等作用。 笔者应用神经毒素1一甲基~4一苯基一1,2,3,6一四氢吡啶 (MP1rP)制作帕金森病小鼠模型,以期阐明和厚朴酚对 神经元的保护作用和可能的作用机制。 关键词:和厚朴酚 厚朴提取物 长沙上禾生物 帕金森病 1.1 实验材料C57BL/6雄性小鼠60只,体重20~ 25g,由军事医学科学院动物实验中心提供。和厚朴酚(长沙上禾生物www.staherb.com) 1.2 方法 1.2.1 动物模型的建立及分组给药小鼠随机分为5 组,每组12只,分别为对照组、MP,rP模型组、金刚烷 胺组(阳性对照,40mg/kg)、和厚朴酚A组(10mg/kg)、 和厚朴酚B组(30mg/kg)。金刚烷胺与和厚朴酚均为 预防性给药,连续灌胃14d。除对照组给予等体积的生理盐水外,其余4组均从用药第11天开始,在灌胃给 药前1h腹腔注射MPTP 30mg/kg,连续4d,最后1次 给药后1d进行行为学指标测试,4d后脱颈处死,分别 取小鼠脑纹状体和黑质,于-80℃保存,用于测定组织 中多巴胺(dopamine,DA)含量。判定造模成功指标为: 小鼠出现暂时性躯干震颤、竖毛、尾巴过伸、动作减少 等不自主运动。 1.2.2 一般行为学观察 观察小鼠在腹腔给予 MPTP造模后的一般行为表现,有无异常反应,比较各 组之间的差异。 1.2.3 自主活动实验使用XZ24型小鼠自主活动仪 测定小鼠自发活动并计数。将小鼠放入自主活动箱中 (高13cm,直径25cm,每次同时测定4只小鼠,每个活 动箱中1只)由记录仪自动记录小鼠活动,测定每只小 鼠5min内的活动次数[2]。 1.2.4 DA含量测定 采用高效液相一电化学法 (HPLC_EC)测定纹状体内DA的含量。 1.3 统计学处理 计量资料以至±s表示,经SPSS 13.0统计软件处理。5组之间两两比较采用单因素方 差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。 2 结 果 2.1 一般行为学观察腹腔给予MPTP(30mg/kg)后 5min,小鼠出现暂时性躯干震颤、竖毛、尾巴过伸、动作 减少等不自主运动,证明帕金森模型建立成功。与对 照组相比,MPTP模型组小鼠的一般行为表现异常,大 多数出现下列变化:举尾、竖毛、唾液分泌增多、呼吸加 快、肌张力减退以及牙颤等,持续时间一般为3-4h。 而和厚朴酚A组、B组和金刚烷胺组,其症状表现较 轻,持续时间较短。 2.2 自主活动实验MPTP模型组5min自主活动次 数比对照组明显减少(P<0.01);和厚朴酚A组和B组 分别与MPTP模型组相比,5min自主活动次数明显增 JJI1(P<0.05)。金刚烷胺组与和厚朴酚A、B组相比,自 主活动次数无明显差异(P>0.05,表1)。 2.3 DA含量MPTP模型组与对照组相比,DA含量 明显降低(P<0.01)。和厚朴酚A、B组以及金刚烷胺 组的DA含量均明显高于模型组,(PO.05),说明给予和厚朴酚预处理,能够增加纹状体内DA的含量(表 1) 3 讨 论 利用MPTP造模是目前最常用的制备帕金森病 动物模型的方法。单胺氧化酶B将MPTP催化为 MPP(+),通过抑制线粒体氧化呼吸链、产生反应氧族 和一氧化氮等,导致黑质多巴胺能神经元坏死、凋亡, 使动物产生类似于帕金森病的症状和病理改变。本实 验结果表明,MPTP可诱发小鼠在行为学方面出现肌 肉震颤、随意运动增加、自主活动次数减少等类似帕金 森病的特征。 厚朴酚(magnolo1)、和厚朴酚是我国传统中药厚朴 的两种主要活性成分,临床应用具有抗焦虑、抗抑郁、 抗吗啡戒断反应、抑制儿茶酚胺分泌等作用。研究表 明0.2mg/kg或更大剂量的和厚朴酚不仅可抗焦虑,而 且无安定样副作用[4]。和厚朴酚通过拮抗Na 和Ca。 等离子的细胞内流,从而抑制乙酰胆碱诱导的肾上腺 嗜铬细胞瘤中儿茶酚胺的分泌。 本研究发现,和厚朴酚能使帕金森病模型大鼠的 行为症状有不同程度的改善,能提高纹状体内DA水 平,并能改善自主活动能力。推测其机制可能与和厚 朴酚可营养神经元,促DA能神经元存活、分化和生 长,从而部分恢复DA合成及代谢等作用有关。 厚朴提取物 和厚朴酚 厚朴酚 厚朴总酚 长沙上禾生物 www.staherb.com |