中药制剂的薄层扫描法 |
发布时间:2014-12-30 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:2356 |
薄层扫描法是用一定波长的光照射在薄层板上,对薄层色谱有紫外光和可见光吸收的斑点,或经激发后能 发射出荧光的斑点进行扫描,将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、检查和含量测定的方法。薄 层扫描法具有分离效能高、快速、简便等特点,因而适用于中药的分析。薄层扫描法虽然精密度不如HPLC 法高,但可作为补充,,用于无紫外吸收,或不能用HPLC法分析的组分如人参皂甙、贝母生物碱等。 内采用吸收测定法测定。有荧光的组分,可选择好激发光波长(λex)和发射波长(λem),用荧光法具 有专属性强、灵敏度高和线性范围宽度等特点。 射光灵敏度较低, 外光有吸收,所以实际应用较少。 S);另一束作为对照,称参比波长(λR)。两束光通过斩光器交替照射到斑点上,以吸收度之差ΔA定量 。双波长可以消除薄层不均匀的影响,使基线变得平稳。测定波长一般选测定组分的最大吸收波长,参比 波长可选在组分无吸收的位置,若背景光谱中与λS的等吸收处,可达到排除背景干扰的目的。单波长法通 常用斑点吸收光谱的测定。 斑点形状不规则或浓度不均匀时误差大,主要用于荧光测定;锯齿扫描是用一微小的光束同时互相垂直的 两个方向进行锯齿状扫描,由于光束小 (1.25mm*1.25mm),光束内部浓度差异可以忽略不计,因而受 斑点形状和浓度分布的影响小。 吸收度由于散射而减小,A-KX曲线偏向横轴,不成直线,其形状与SX有关。为测定方便。薄层扫描仪均装 有线性化器,用于对工作曲线进行校正,使其成为直线。因此,测定时需输入散射参数SX值。不少薄层板 的SX值已知。若未知,可根据校正结果判断(图)。 校正法。测定时,供试品溶液和对照品溶液应交叉点于同一薄层板上,供试品点样不少于4个,对照品每一 浓度不少于2个。 。 点样应准确,原点大小应一致;喷洒显色剂应均匀,量适中;并用胶布加以固定。 去甲醇,残渣加水溶解后,用正丁醇提取纯化,正丁醇减压回收后,残渣加甲醇溶解,作为供试品溶液; 另取人参皂甙Rg1对照品,加甲醇制成每ml含0.5mg的溶液,作为对照液。吸取供试品溶液2~4μl,对照品 溶液2μl和4μl分别交叉点于高效硅胶G薄层板上,以氯仿- 醋酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)5~10℃ 放置12小时的下层液为展开剂,展开,取出,晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液,110℃加热至斑点颜色清晰, 取出,在薄层板上盖同样大小的玻璃板,用胶布固定,照薄层扫描法测定,波长:λS = 525nm,λR = 700nm,测定供试品和对照品吸收度积分值,计算,即得。 (m1 - m2)/(A1 - A2), a = m1 - bA1 的手选方法。95版一部已有12种药材和制剂用高效液相色谱法测定含量,并有增加趋势。 多;使用甲醇-水或乙腈-水的混合溶剂作为流动相。使用反相色谱,制剂中极性的附加剂及其他干扰组分 先流出,不会停留在色谱柱上污染色谱柱。若分离酸性组分,如丹参素、黄芩甙、甘草酸等,可在流动相 中适量加入酸,如醋酸、磷酸,以抑制其解离;对酸性较强的组分,也可使用离子对色谱法,常用的反离 子试剂有氢氧化四丁基铵等。若为碱性组分,如小檗碱、麻黄碱等,多采用反相离子对色谱法,在酸性流 动相中加入烷基磺酸盐,有机酸也可使用无机阴离子,如磷酸盐作为反离子。一般使用紫外检测器,紫外 检测器灵敏、稳定。 |