绿原酸又名咖啡鞣酸，属酚类化合物，是植物体在有氧呼吸过程中经葬草酸途径形成 的一种苯丙素类物质“1 绿原酸(Chlorogenic acid)是我国传统名贵中药杜仲的主要活性成 分其半水合物为针状结晶，具有利胆、抗菌、 抗病毒，降压、增高白细胞及兴奋中枢神经系 统等多种药理作用，是保健品、食品、药品、化 妆品等重要原料[2 。近年的研究表明，杜仲叶 中绿原酸含量丰富，可达1％～5．5％。杜仲叶中 绿原酸的分离方法，目前常用的有萃取法、沉 淀法和聚酰胺柱层析法等，这些方法多存在 成本高、收率低、操作烦琐、材料不易再生等 缺点。近年来，离子交换树脂吸附法用于中草 药中活性性成分的提取与纯化取得取得很好 的效果，日益受到人们的重视 】。本试验以杜 仲叶为原料，采用水提法对杜仲叶绿原酸进行粗提，然后采用不同离子交换树脂对杜仲 叶绿原酸的吸附性能进行比较，旨在筛选出 一种吸附性能和收率高的树脂用于替代传统 绿原酸提取方法。

1 材料

杜仲叶：采于重庆市荣昌县直升镇道 观村5组；绿原酸标准品(中国药品生物制品 检定所，批号：l 10753—20041 3)；Amberlite FPA98CL树脂、Amberlite FPA958CL树脂均由北京大学生命科学院宋加宾教授提 供{强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂(杭州 争光树脂厂，批号：ZGA307)；Tu一1901型双 波束紫外可见分光光度计(北京普析通用 仪器有限责任公司)、2004型恒温水浴锅(常 州国华电器有限公司)、ESJ120-4型电子分 析天平(沈阳龙腾电子有限公司)。

2 方法

2。1杜仲叶绿原酸粗提液的制备 粉碎新鲜杜仲叶后，按l：l2的料液比 加入蒸馏水，在50℃恒温水浴浸提3次，每 次2h，合并3次浸提液，将浸提液减压浓缩 1／2，再将浓缩液中加入1％壳聚糖絮凝，过 滤，滤液用活性碳脱色，得到杜仲叶绿原酸粗提液。

2．2树脂预处理及再生

将Amberlite FPA98CL树脂、Amberlite FPA958CL树脂、强碱性苯乙烯交换树脂分 别用蒸馏水水溶胀，然后用lmol／L的NaOH 溶．恣搅拌浸泡4h，蒸馏水洗至中性，然后用 0．~ Iol／L的HCl搅拌缦泡4h，用蒸馏水洗 至中 性待用。

2． 树脂静态吸附实验

准确称取预处理的Amberlite FPA98CL、 Ambeflite FPA958CL、苯乙烯离子交换树脂各5 ，按1：1000~入粗提液于2000ml_~角瓶， 在25℃的恒温水浴振荡器上振摇吸附8h，用 100目尼龙布过滤树脂，一倍树脂量的40％乙 醇50℃下搅拌洗脱8h，洗脱液中经甲醇重结 晶得绿原酸纯品。计算出杜仲叶中绿原酸收率(mg／Kg)。

三种树脂的对绿原酸的吸咐率依下式 计算[8】． E％：— Co — Yo - ～ Cy, ×100％ ‘ Co为吸附前溶液的浓度(mg／m1)；C 为 吸附后溶液的浓度(mg／m1)；V 为吸附前溶 液的体积(m1，lV．吸附后溶液的体积(m1)；W 为树脂重量(g)。

2．4数据处理

应用SPSS1 l软件对三种树脂杜仲叶绿 原酸提取率和{}寸脂吸附率进行显著性t检 验，比较组间差异性。

3 结果

3．1三种树脂对杜仲叶提取液绿原酸吸附容量 结果见：表l所示，三种树脂对杜仲叶中 绿原酸吸附容量(绿原酸mg／g树脂)Amberl FPA98CL型树脂、Amberlite FPA958cL型树 脂吸的附容量接近差异不显著，而苯乙烯离 子交换树脂吸附低容量，不能用于杜仲叶中 绿原酸的提取。

3．2 三种树脂对杜仲叶提取液绿原酸提取盔 采用三种树脂吸附后，杜仲叶绿原酸的提取率(绿原酸mg／lOOg杜仲叶)相差较大，结 果如表2所示，采用AmberHte FPA98CL型树 脂的绿原酸收率最高，与其余两种树脂比较 差异显著。

3．3 Amberl ite FPA98CL树脂吸附的最适条件 为适应工业化的生产，我们采用静态 吸附方法，而树脂的用量是最大影响因素之一。本试验采用不同类型的树 脂下进行吸附实验，结果表明．在pH值为 4，树脂用量2．34g／100m1吸附效果最好。

4 分析与讨论

大孔吸附树脂具有吸附量大 选择性 好、易解吸、易再生、成本低、效率高，特别 适用水溶性化合物的提取分离等优点，国 内外学者已广泛将其用于生物碱、皂甙、黄 酮、多糖等的提取，取得了显著的效果【9】。本 试验利用大孔吸附树脂分离杜仲叶绿原 酸，其工艺较简单、成本低。产率高．

从试验的结果看出，Amberlite FPA08CL 和Amberlite FPA958CL树脂都对绿原酸具有较强的吸附作用，而苯乙烯系阴离子交换树 脂则吸附效果较差，但从收率来讲Amberlite FPA98CL树脂收率又远高于Amberlite FPA958CL树脂，这和Amberlite FPA98CL树 脂特性有关，它除有离子交换作用外还具有 分子筛功能，既能有效的和绿原酸进行吸附， 又能快速的洗脱而脱吸附。

Amberlite FPA98CL树脂对绿原酸最适吸附pH值为4。绿原酸作为多羟基酚酸， 在酸性条件下易被吸附。因为在酸性条件 下，绿原酸以分子形式存在，树脂对其吸附作用增强；在强酸条件下，以内酯形式存在的 绿原酸容易水解；在碱性条件下，以离子形式 存在的绿原酸则不易被吸附。 树脂吸附法用于杜仲叶中绿原酸提取是一种操作简便、节约有机溶剂，较高收率 的提取方法，罗门哈斯公司Amberlite FPA98CL在DH4条件下，树脂用量2．34g／ 100ml，能够达到鲜叶最大3．04％的收率

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