木犀草素抗菌活性研究 |
发布时间:2013-12-10 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:1276 |
木犀草素是一种很具有代表性的天然黄酮,属弱酸性四羟 基黄酮类化合物,在植物界分布较广;标准程序的化学分析研究表明,等摩尔浓度条件下的木犀草素与槲皮素及辣椒素相 比,木犀草素具有最强的抗氧化活性;有关药理及l临床实验 的结果还表明木犀草素在体内具有抗菌、抗病毒及降低血脂和胆固醇的作用,I临床主要用于止咳、祛痰、消炎等 。本文主要对其抗菌活性进行研究。 1 材料与方法 1.1 材料和仪器木犀草素(纯度98 )。RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂):UV 265型紫外可见分光光度计(日本岛津公 司):超净工作台、电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂)。 1.2 实验方法抗菌能力测定采用试管稀释法 ]。取两环斜 面菌种于5 mI 液体培养基(肉汤膏10 g、蛋白胨10 g、葡萄糖 1 g、NaC1 5 g和水1 000 mL组成,pH调到7.2)在37℃(酵 母27℃)培养6 h,显微镜下观察计数,调整到含菌1O~ 100 个/mL备用。 用液体培养基将木犀草素释成不同浓度,灭菌锅中灭菌, 待冷至室温后,超净工作台中,在无菌条件下接种5O“I 制备 好菌种,同时设吐温一8o接菌和对应浓度药物不接菌,重复3 次。培养箱中37℃(酵母27。C)培养24 h后,在640 nm测定 吸光度,以吸光度为纵坐标,药物浓度为横坐标绘制抑菌曲线。曲线中吸光度开始下降浓度为起始抑菌浓度,吸光度降到和对 应药物不接菌吸光度相等时浓度为完全抑制浓度(MIC)。从 完全抑制后各管中取5O L接种于平板培养基中再培养48 h, 以不长菌为杀菌浓度(MBC)。 2 结 果 2.1 木犀草素抑菌曲线测定结果见图l~4。 2.2 木犀草素杀菌MBC值供试菌种:金黄色葡萄球菌430 mg/L,枯草杆菌320 mg/L,大肠杆菌510 mg/I ,啤酒酵母390 mg/L。 3 讨 论 从不同浓度木犀草素对枯草杆菌等菌抑制结果(见图1) 可看出:当木犀草素浓度增大到50 mg/L时,吸光度开始降 低,说明随浓度增加,细菌的生长受到抑制数量在减少,此浓度为起始抑菌浓度;当浓度高到200 mg/L,吸光度值降到与药物不接菌线重合,说明此时细菌生长受到完全抑制,此浓度为最 小抑菌浓度。从图2~4中可看出,对大肠杆菌起始抑制浓度 为50 mg/L,最小抑制浓度为300 mg/L~对金黄色葡萄球菌起始抑制浓度为25 mg/L,最小抑制浓度为300 mg/L;对啤酒酵 母起始抑制浓度为25 mg/L,最小抑制浓度为250 mg/L。实验测得供试验菌种的MBC值,表明木犀草素对这4种菌的最 小杀菌浓度各不相同。 木犀草素对食品中常见供试4 种菌具有高效抗菌活性,且随浓度增加而增强,对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、啤酒酵母和 大肠杆菌最小抑制浓度分别为300 、200 、250 、300 mg /L 。因食品遭受微生物污染会腐败变质,因而要加入防腐剂抗菌, 并添 加抗氧化剂以延长食品保质期。常用的一些化学防腐剂如苯 甲酸钠已引起消费者对其安全性质疑,故从植物中寻找有抗 菌、抗氧化作用且安全性高的活性物质,木犀草素作为天然防 腐剂在食品、医药等领域有着广泛应用前景,具有很好开发潜 力。 |