功能性食品齐墩果酸研究进展 |
发布时间:2013-12-10 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:2071 |
摘 要:综述了近几年来在齐墩果酸的分析方法、提取分离方法和生理功能等方面的研究进展。 关键词:齐墩果酸 分析 提取 功能 Advances in the research of Oleanolic acid Abstract:In this paper, the advances in the research of Oleanolic acid, including analysis, extraction functional effects were reviewed. Key words:Oleanolic acid; analysis; extraction; functional 齐墩果酸(Oleanolic acid.简称OA),又名庆四素, 是五环三萜类化合物,广泛地存在于医学草本植物 和其他植物中:如山楂、乌梅、女贞子、牛膝、槐木 和山茱萸等.OA以游离或结合成苷的形式存在,可 从中草药中提取分离得到。据不完全统计,在自然 界已有34科126种植物中分离得到齐墩果酸。由于 其广泛的生物学活性。近年来国内外对其提取、含 量测定、药理作用方面进行了大量的研究工作,欧 美国家现已将其作为天然抗氧化剂应用到食品中。 1 齐墩果酸的理化性质 齐墩果酸分子式为c30H钙O ,结构式见图1,分 子量为456.71。为白色簇状针晶,无色、无味、无 臭,不溶于水,可溶于乙醇、氯仿、乙醚、丙酮等。熔点:3 10~C,Liebermann—Burcbard反应呈紫红色。 2 齐墩果酸的分析方法 齐墩果酸分析方法主要包括高效液相色谱法 (HPLC)、薄层色谱法(TLC)、毛细管电泳法(cE)和气相 色谱法(Gc)等方法。 2.1 高效液相色谱法 在齐墩果酸分析中,HPLC是最常见的分析方 法。因其分析范围广、速度快、分离效能高,在齐墩 果酸分析中得到了广泛应用。HPLC常用紫外波长检 测器(uv)、蒸发光散射检测器(ELSD)~I荧光检测器 fFD)作为检测手段。 石心红等Ⅲ采用高效液相色谱法(HPLC)~定女贞 子中齐墩果酸。得出最佳色谱条件为:Shim—Pack C 分析柱(4.6mmxl50mm);流动相为乙腈一甲醇一水一乙 酸胺(70:16:14:0.5);流动相流速为1mlJmin。进样量 101xL。线性范围0.01~0.40mg/mL。分析结果表明, 此法简单快速、高效灵敏、重现性好。 2.2 薄层色谱法 TLC法经济、简单、分离能力强.许多原料中 齐墩果酸可以通过这种方法进行定量。但其重现性、 选择性较差。 曹艳丽等圆采用薄层扫描法对女贞子中齐墩果酸 的含量进行了测定。其TLC测定条件为:展开剂为 环已烷一丙酮一醋酸乙酯(5:2:1)。显色剂为体积浓度 10%的硫酸乙醇溶液。结果表明。该方法简便、快 速、准确、经济、数据可靠。 2_3 气相色谱法 GC法精密度高。检测限低。但此方法工艺繁 琐,样品需先进行衍生化,操作难度大。 闫花丽等¨3_采用气相色谱法对夏枯草中齐墩果酸的含量进行测定。得出最佳色谱条件:色谱 柱10% SE一30不锈钢柱(2mx3mm)。FID检测器,汽 化室及检测器温度300~C。色谱柱温度270~C。载 气高纯氮。流速80mlJmin。灵敏度10。线性范围 0.0025~0.4mg/mL。齐墩果酸平均回收率为93.53%, RSD为3.5%。结果显示GC法分离能力强、数据 可靠。 2.4 毛细管气相色谱法 CE是近几年分析化学中发展最为迅速的领域之 一 , 尤其是高压毛细管电泳(HPCE)。兼有高压电泳 的高速、高分辨及HPLC的高效率等优点。 刘垣升等 用毛细管气相色谱法测定女贞子中齐 墩果酸含量,取女贞子氯仿提取液。挥干,甲醇溶解 经甲酯化后进样分析。色谱条件:甲基硅橡胶固定 液毛细管柱(25mx0.32ram,0.521xm);氮气为载气,分 流比为10:1:柱温280~C:进样器和检测器温度 300~C,氢火焰离子化检测器。线性范围2-100mg/L, 回收率为(too.6±1.9)%。表明气相色谱法可以作为齐 墩果酸质量检测方法。 cE的快速分离(i一30rnin)、很小的进样量和极 低的溶剂消耗,使CE成为一种非常有前景的分析 工具. 3 齐墩果酸的提取分离 3.1 乙醇和甲醇提取 齐墩果酸的提取一般采用乙醇和甲醇进行提取。 提取物再进行分离纯化。但却存在成本高、工艺过 程复杂。污染严重等缺点。有报道采用大孔吸附树 脂对提取物进行分离效果较好。 林舒等同研究了用超声一大孔树脂法分离纯化女 贞子中齐墩果酸的工艺,将干燥的女贞子用10倍量 的75%乙醇浸泡24h后,40kHz超声提取2次。每次 10rain,回收乙醇,加水得浓缩液。将浓缩液直接上 样于AB一8型大孔吸附树脂柱。用无水乙醇洗脱,收 集无水乙醇的洗脱液105~C干燥。浓缩结晶得到齐墩 果酸产品。女贞子预处理取得的浸膏经大孔吸附树 脂吸附纯化后。回收率为97.7%。纯化结果理想,说 明吸附纯化法有利于提高纯度。 3.2 对含齐墩果酸的皂甙进行水解 有些植物原料中齐墩果酸以皂甙的形式存在, 必须将皂甙水解才能采用溶剂进行提取、分离。 王忠壮等同对从太白槐中齐墩果酸进行提取时。 取太白梅木根、茎皮粉,加入适量黑曲霉拌匀。在常 温发酵48h以上。加水煮沸、过滤。滤液加稀硫酸至 浓度为3%。热压水解3h(蒸气压1.5kg/cm2)。静置冷 却后过滤。弃去酸液。滤渣乙醇回流提取。提取液减 压回收乙醇。浓缩成稠膏加入5%NaOH溶液。搅拌 煮沸、过滤。加入95%乙醇及适量的活性炭。加热 溶解脱色,趁热过滤,于滤液中加入HC1调pH至1, 静置冷却24h以上,滤取结晶。用蒸馏水洗至无cl一。 结晶烘干即得齐墩果酸。 3_3 采用超临界萃取技术进行制备 超临界CO 流体萃取技术应用到齐墩果酸中, 选择性较高。较好地保持齐墩果酸的生物活性。有 利于节约资源。对于提取高附加值的齐墩果酸来说 具有广阔的前景。 喻世涛等朋采用超临界CO,流体萃取中华雪胆中 齐墩果酸,超临界提取的最佳条件:萃取压力 40MPa,萃取温度55~C,无水乙醇为夹带剂。用量为 5%,萃取时间为2h,CO 流量为20kg/h。超临界CO 流体萃取法提取齐墩果酸避免了有机溶剂的大量使 用,具有成本低、杂质少、实验环境安全等优点。 4 齐墩果酸的生理功能 4.i 抗肿瘤作用 近年来,人们对OA抗肿瘤的作用机制研究主要 通过以下几方面进行:(1)齐墩果酸能抗DNA突变、 抑制癌变的启动。有研究认为,OA对结肠癌细胞系 HCTI5产生影响的作用机制是通过阻断肿瘤细胞的细胞周期而抑制肿瘤细胞的增殖 1。(2)齐墩果酸 具有肿瘤逆转作用及抗侵袭性。有学者在对五环三萜 类化合物抗人肺癌细胞增殖、侵袭和诱导细胞凋亡作 用机制的系列研究中指出,OA抗侵袭作用可能是通 过对癌细胞黏附作用、趋化运动和抑制组织蛋白酶B 的分泌而实现,其抗侵袭机制不是对侵袭某一环节 的阻断,而是对侵袭各个基本环节都有抑制作用[91。 (3)诱导肿瘤细胞凋亡;有研究通过检测小鼠巨噬细 胞中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子一 NF— )的释放 以及诱导型一氧化氮合酶(iNOs)、TNF— 的基因表达 水平发现,OA能诱导NO和TNF— 的释放减少,并 通过细胞核因子(NF卜kappaB的转活正性调节iNOs和 TNF— 的基因表达,从而发挥其抗癌作用I】01。(4)抑制 肿瘤血管形成。总之,OA的抗癌作用几乎贯穿了肿 瘤发展的各个阶段⋯】。 4.2 保肝作用 OA化学结构有双键、羟基、羧基等多个活泼 官能团,易发生一些化学反应,如与体内毒性物 质结合,起到解肝毒作用。 实验研究发现:齐墩果酸可使变性坏死的肝组 织恢复正常,减轻丙氨酸活力下降,肝组织炎症反应 减弱,血中丙种球蛋白下降,并能促进肝细胞再生, 使坏死区迅速修复[121。OA预处理也可防止四氯化碳诱 导的肝谷胱甘肽的排空。动物实验还证实经OA预处 理可将肝中金属硫蛋白(Mrr)增加了近30倍,OA可以 通过作用于MT而保护镉诱导的肝损伤。经临床验证, OA可有效治疗病毒性肝炎,是抗病毒性肝炎药的主 要活性成分。 4.3 降血脂、降血糖 早期文献报道,OA可降低实验性糖尿病大、小 鼠血糖水平,对实验性高血脂症大鼠和兔均有明显的 降脂作用。殷峻等人对OA的降糖机制进行了研究, 通过采用与人肝细胞表型相似的人肝癌细胞(HepG2)检 测24h培养液中葡萄糖的消耗量发现,OA可使糖耗 量轻度增加,但同时使胰岛13TC 细胞的胰岛素分泌 量减少25%~29%,故认为OA主要不是通过肝细胞 发挥降糖作用,而是存在其他作用机制I】31。Yoshikawa M等的研究发现OA通过抑制胃排空及小肠段对葡萄 糖的摄取实现降糖作用,且OA刺激多巴胺受体的产 生,引起PG的释放导致胃排空受抑制I】51。 44 对心血管作用 OA对心血管疾病作用是OA药理作用研究的新发现。Somova L0等首次提出0A具抗高血压及强心活 性。研究指出,0A对实验f生高血压大鼠无直接降压作 用,但有直接的强心作用。当大鼠长期服用OA后,能 有效抑制严重高血压的发展。随后有学者对0A抗高血 压作用机制进行研究,认为0A是通过影响血管内皮L一精氨酸一一氧化氮途径而发挥降压效应,并不涉及 其他降压机制。研究证实:0A对局部缺血及再灌注 的心律失常有显著的抗心律不齐活性.0A的强心及 抗心律失常作用均通过阻滞B肾上腺素受体实现。鉴 于0A同时具有降压、强心及抗心律失常作用,对于高 血压合并心绞痛及心力衰竭的患者将是一个很好选择。 5 展望 OA是一种天然来源的药物,除具有保肝、护胃、 强心、抗心律失常、降血糖、降血脂、抗高血压的生 物活性外,还具有抗炎、抗病毒、免疫调节、抑制血 小板聚集和抗过氧化等多种药理作用,齐墩果酸对动 物无明显毒、副作用, 安全低毒,可将其作为抗氧化 剂应用于食品]二业中,还可将其加工成保健食品。因 此,随着研究的深入,齐墩果酸将在食品工业中得到 广泛的应用。
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