骨质疏松症(Osteopomsis，OP)是一种以骨量减少和骨微观结构退化为特征，导致骨的脆性增加以致于易发生骨折的一种全身性代谢性骨病，通过骨组织形态计量方法测定出的骨组织形态计量学指标可量化骨微观结构的改变。我们前面的试验研究已表明淫羊藿苷可改善骨质疏松模型小鼠的骨密度及骨生物力学指标Ⅲ ，本研究以观察淫羊藿苷对骨质疏松模型小鼠骨组织形态计量学指标的影响，旨在观察淫羊藿苷对骨质疏松症骨微观结构改变的影响，从而进一步探讨淫羊藿苷的抗骨质疏松作用。

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．1．1 实验动物KM 种小鼠，雌性，4周龄，体重 18~22 g；一级实验动物，由贵阳医学院实验动物中心提供，合格证：SCXK(黔)2002—000l。 1．1．2 药物与试剂 淫羊藿苷(南京崇原生物科技有限公司批号：20070501)，己烯雌酚(合肥久联制药有限公司批号：20060518)。

1．1．3 主要仪器及设备 AO一820型轮动式切片机—— 美国。BI一2000医学图像分析系统，成都泰盟科技有限公司。

1．2 实验方法取昆明种雌性小鼠，体重18422 g。用0．4 戊巴比妥钠0．1 mI ／lo g腹腔注射麻醉。将麻醉后动物俯卧位固定，剪去背部被毛，碘酒、酒精依次消毒背部皮肤，于脊柱两侧分别作一纵行切口，分离肌肉、打开腹腔，分别找出左右卵巢，将其牵出，结扎子宫及动脉，剪去卵巢，逐层关腹。切除双侧卵巢小鼠为造模小鼠，对照组动物切除卵巢旁部分脂肪组织，保留卵巢。将造模小鼠随机分为：模型(等容积常水)、己烯雌酚(2 mg／kg)、淫羊藿苷高剂量(20 mg／ kg)、淫羊藿苷中剂量(10 mg／kg)、淫羊藿苷低剂量(5 mg／kg)组，加上对照组(等容积常水)，实验动物共分为6个组。各组动物按各自药物和剂量灌胃给药，1次／d，连续给药2个月，停药后次日，称小鼠体重，脱颈椎处死动物，取含股骨头的一段右侧股骨，常规脱钙，石蜡包埋切片，片厚4 m，HE染色，以BI-2000 医学图像分析系统进行骨组织形态学观察，计量： (1)骨小梁平均宽度；(2)骨皮质平均厚度；(3)骨小梁面积；(4)成骨细胞数；(5)破骨细胞数。

1．3 统计方法 实验数据用以均数士标准差( ± s)表示，采用Excel 2003进行统计，组间比较采用 Student—t检验。

2 结 果

与对照组比较，模型组小鼠骨小梁平均宽度变窄、骨小梁面积变小、骨皮质平均厚度减小、成骨细胞数明显减少，破骨细胞数明显增高，差异有显著意义(P<0．05、P

3 讨 论

骨组织形态计量学可将二维图像展示的骨组织和细胞结构进行定量分析，能够定量观察和研究骨组织的形态及结构，为骨结构、骨形成及骨吸收提供客观数据 j。骨形态计量学指标是评价骨转换与骨结构的最直接最客观的指标。本研究以切除雌性小鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松模型小鼠，运用骨形态计量的方法测定各组动物的骨形态计量学指标，观察淫羊藿苷对去卵巢小鼠骨形态计量学指标的影响。

试验结果显示，去卵巢后小鼠骨小梁平均宽度、骨皮质平均厚度、骨小梁面积均有明显下降，淫羊藿苷各剂量组小鼠的上述指标均明显升高，说明骨的内部结构得到很好的恢复。在正常骨代谢过程中，骨的吸收和形成处于动态平衡状态，因各种原因引起骨的吸收过多和形成不足导致平衡破坏，可使骨量减少、骨质疏松。骨的形成由成骨细胞完成，骨的吸收受破骨细胞控制。小鼠去卵巢后，成骨细胞数明显减少而破骨细胞数明显增多，给以淫羊藿苷治疗后可以升高成骨细胞数，同时降低破骨细胞数，由此认为，淫羊藿苷既能抑制骨的吸收，又能刺激衍化增生成骨细胞，产生较多的骨基质，使骨代谢转为正态平衡，在有效的维持骨量的同时，还能使已丢失的骨质得以一定程度的恢复。淫羊藿苷可明显改善骨质疏松模型小鼠的骨计量学指标，对去卵巢小鼠所致的骨质疏松具有治疗作用。且淫羊藿苷的抗骨质疏松作用与其抑制骨的吸收，促进骨的形成，逆转骨的代谢平衡有关。本实验中，淫羊藿苷高、中、低剂量组之间剂量差最高可达4倍，但各剂量组间作用并无明显差异，因此，建议在临床应用时尽可能选择小剂量用药。