大黄素广泛存在于植物性泻药，如大黄的根茎、芦荟的叶子、决明的种子中、鼠李的树皮和根皮。从大黄的根茎可提取大黄素。通过合成也可以制备大黄素，例如以2-甲基蒽醌，或以3，5-二硝基苯酐和间甲酚为原料，者可以制得大黄素。