红曲中的落伐它丁测定(HPLC-UV法)-上禾生物

1．范围

  本标准适用于红曲（Monascus  sp.）中的落伐它丁（lovastatin又称monacolin K）含量测定。

2．原理

  落伐它丁在紫外区有吸收，通过选择该物质的最大吸收波长，以获得最大的灵敏度和抗干扰能力，选择合适的洗脱剂，以测定柱洗脱液在流动池中吸收紫外光的大小来确定其含量。

3．试剂  

3.1 超纯水    

3.2 甲醇（色谱纯）

3.3 落伐它丁（lovastatin又称monacolin K）。

4．仪器

4.1 高效液相色谱仪（Waters）

4.2 分析天平（1/100000）

4.3 超声波清洗仪

4.4  0.45 mm 微孔膜过滤器

4.5 容量瓶

4.6 具塞小玻璃瓶

4.7 色谱柱   Kromasil  ODS C₁₈ 5 mm 4.6´200mm

5．分析步骤

5.1  标样制备  精密称取标样用75%酒精溶解，使其浓度为0.1mg/ml，过0.45mm滤膜，置冰箱贮存。

5.2 待测样品  精确称取200mg提取物于50ml容量瓶中，用75%酒精溶解，超声1hr  冷却定容，0.45 mm微孔滤膜过滤为供试液。

5.3 色谱条件

   流动相   A:水       B: 甲醇

    A : B = 23 : 77 ( V / V等梯度)

   流速     1.0 ml/min

   波长     238nm

   进样量   10 ml

5.4 样品的测定：

   精确吸取待测样品供试液与对照品供试液各10ml，注入液相色谱仪，得出峰面积。

5.5 计算：

   根据样品与对照品各峰峰面积之比比较各种成份的含量（外标法）