橄榄叶中橄榄苦甙的测定（HPLC-UV法）--上禾生物

1．范围

本标准适用于橄榄叶（Olive  leaf）中橄榄苦甙（Oleuropein）含量的测定。

2．原理

  橄榄苦甙在紫外区有吸收，通过选择该物质的最大吸收波长，以获得最大的灵敏度和抗干扰能力，选择合适的洗脱剂，以测定柱洗脱液在流动池中吸收紫外光的大小来确定其含量。

3．试剂  

3.1 超纯水    

3.2 乙腈（色谱纯）

3.3 甲醇（分析纯）

3.4  标样：橄榄苦甙（Oleuropein）

4．仪器

4.1 高效液相色谱仪（Waters）

4.2 分析天平（1/10000）

4.3 超声波清洗仪

4.4  0.45 mm 微孔过滤器

4.5 容量瓶

4.6 带塞小玻璃瓶

4.7 色谱柱   Kromasil    C₁₈ 5 mm  4.6´200mm 大连化物所

5．分析步骤

    5.1  标样制备  精密称取标样用甲醇溶解，使其浓度为0.1mg/ml，过0.45mm滤膜，置冰箱贮存。

5.2  待测样品  精确称取60mg提取物于50ml容量瓶中，用甲醇超声溶解，冷却定容，0.45 mm微孔滤膜过滤为供试液。。

5.3 色谱条件

   流动相   A：水       B：乙腈

    A : B = 74 : 26 ( V / V等梯度 )

   波长     254nm

   流速     1.0 ml/min

   进样量   10 ml

5.4  样品的测定：

   精确吸取待测样品供试液与对照品供试液各10ml，注入液相色谱仪，得出峰面积。

5.5  计算：

根据样品与对照品各峰峰面积之比比较各种成份的含量