常春藤提取物常春藤苷C的含量测定

1色谱条件

Agilent1200高效液相色谱仪;Thermo Hypersil BDS C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm);流动相:乙腈-水(28∶72);流速:0.8mL·min^-1，柱温:35℃，检测波长:201nm。

2对照品溶液的制备

取常春藤皂苷C对照品适量，加50%乙醇水制成每1mL含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。

3供试品溶液的制备

取适量朝鲜白头翁药材，粉碎，过3号筛，精密称定，称取1g于具塞锥形瓶中，向其加入50%乙醇水溶液50mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用50%乙醇水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL置25mL量瓶中，加50%乙醇水定容至刻度，即得供试品溶液。

4方法学考察

4.1空白对照试验

取50%乙醇水作为空白对照溶液，按1项下色谱条件进行测定分析，结果显示，空白对照溶液在与常春藤皂苷C对照品色谱峰保留时间处无色谱峰，表明溶剂对测定没有干扰(见图1、2)。

4.2线性关系考察

分别精密吸取对照品溶液2、4、8、12、16、20μL注入色谱仪，按1项下色谱条件进行测定，以常春藤皂苷C的含量(μg)和相应的峰面积进行线性回归，计算得回归方程Y=364.5341X-1.3262，r=0.9999，结果表明常春藤皂苷C在0.220～2.203μg线性关系良好。

4.3精密度试验

精密吸取同一份供试品溶液(S4)，按1项下色谱条件连续进样6次，记录峰

面积。结果显示，供试品色谱峰峰面积的ＲSD=0.48%，表明仪器的精密度良好。

4.4稳定性试验

精密吸取3项下的供试品溶液(S4)，按1项下色谱条件分别于0、6、8、12、

18、24h进样，记录峰面积。结果显示常春藤皂苷C色谱峰峰面积的ＲSD=0.11%，表明供试品溶液中常春藤皂苷C在24h内稳定性良好。

4.5重复性试验

取3项下的供试品溶液(S4)6份，分别照1项下方法测定，记录峰面积。结果显示常春藤皂苷C峰面积的ＲSD=1.44%，表明此方法的重复性良好

4.6回收率试验

分别精密称取样品(S4)1g，共6份，分别加入常春藤皂苷C对照品适量，按2项下方法制备，按1项下色谱条件进行测定，计算常春藤皂苷C的回收率。结果见表2。

4.7耐用性试验

实验中选取了不同厂家色谱柱(ThermoHypersilBDSC18、PhenomenexGemini C18、VenusilXDP C18)及不同厂家和型号的高效液相色谱仪(Agilent1290、岛津LC-20A、WatersE2695)测定各供试品，结果显示不同厂家色谱柱和不同仪器均

能对样品进行较好分离，适用性良好。

5样品测定

分别取不同产地的18批朝鲜白头翁药材，按3项下的方法制备供试品溶液，照1项下色谱条件进样，记录色谱图，计算含量，结果见表3、图3。

由表3可以看出，18批朝鲜白头翁中常春藤皂苷C含量测定结果为0.806%～4.317%，差异较大，其中，采集于延吉市依兰镇台岩村的朝鲜白头翁(S3)中常春藤皂苷C含量最高，为4.317%;而采集于通化县东来乡的样品(S15)中常春藤皂苷C含量最低，仅为0.806%。

主要参考资料

[1][中国发明,中国发明授权]CN201310618958.2从常春藤叶中分离常春藤苷C及苷元的方法

[2][中国发明,中国发明授权]CN200710034341.0一种从常春藤中制备常春藤苷C的方法