香砂养胃丸—厚朴酚与和厚朴酚的测定（上禾生物）

香砂养胃丸—厚朴酚与和厚朴酚的测定—高效液相色谱法
仪器设备
仪器设备： 1. 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
hyersil ods c18色谱柱（150×4.6mm，5μm），理论塔板数以厚朴酚峰计算不低于2500。
1.3 紫外吸收检测器
2 色谱条件
2.1 流动相：乙腈 + 水 + 冰醋酸 = 50 + 48 + 2
2.2 检测波长：294nm
2.3柱温：35℃
试样制备： 1. 称取供试品
精密称取本品粉末（过50目筛）5g。
2. 对照品溶液的制备
精密称取厚朴酚与和厚朴酚对照品适量，加甲醇制成含厚朴酚0.560g/l与和厚朴酚0.4144g/l的混合溶液，作为对照品储备液。
3. 标准溶液的制备
分别精密量取对照品储备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。
4. 供试品溶液的制备
将供试品置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称重，超声30分钟，放冷，称定重量。用甲醇补重，摇匀，滤过，滤液作为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
应用范围 
本方法采用高效液相色谱法测定香砂养胃丸中厚朴酚与和厚朴酚的含量。
本方法适用于中药制剂香砂养胃丸。
方法原理 
供试品于具塞锥形瓶中，加甲醇超声提取，放冷，过滤，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长294nm处检测厚朴酚与和厚朴酚的吸收值，计算出其含量。
试剂 回目录
1. 甲醇（色谱纯）
2. 乙腈（色谱纯）
试样制备 
1. 称取供试品
精密称取本品粉末（过50目筛）5g。
2. 对照品溶液的制备
精密称取厚朴酚与和厚朴酚对照品适量，加甲醇制成含厚朴酚0.560g/l与和厚朴酚0.4144g/l的混合溶液，作为对照品储备液。
3. 标准溶液的制备
分别精密量取对照品储备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，置于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。
4. 供试品溶液的制备
将供试品置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称重，超声30分钟，放冷，称定重量。用甲醇补重，摇匀，滤过，滤液作为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤 
1. 标准曲线绘制
精密吸取上述标准溶液20μl注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长294nm处测定厚朴酚与和厚朴酚的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。
2. 供试品的测定
精密吸取上述供试品溶液20μl注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长294nm处测定厚朴酚与和厚朴酚的吸收值，计算出其含量。