山茱萸熊果酸等有效成分含量测定和药理作用研究进展

发布时间:2013-06-07 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:3568

山茱萸(Comus Officina!is Sieb．et Zucc)，别名蜀枣、鼠矢、鸡足、山萸肉、实枣儿、枣皮、萸肉等，原植物为山茱萸木属落叶小乔木。我国河南、浙江、山东、安徽、江苏、山西、陕西、四川等地均有分布和栽培，主要产地为豫西、浙江，其品种的优劣对该药材的产量和质量有重要影响临床上习惯以除去种子的成熟果实人药，其味酸、涩，微温，归肝肾经，有补益肝肾、涩精固脱的功效．主治眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、遗尿尿频、崩漏带下、大汗虚脱、内热消渴，是中医l临床常用的名贵传统抗衰老药物之一。关于本品药用的最早记载见于《神农本草经》，列为中品，《中华人民共和国药典》(1995年版)一部亦有收载II-2] 现将山茱萸含量测定及药理作用研究进展概述如下。

1 含量测定

1．1 高效液相色谱法

1．1．1 RP—HPLC法测定马钱素和莫诺苷含量张兰桐等[31报道了高效液相色谱法同时测定山茱萸注射液中马钱素和莫诺苷的含量。色谱柱为Kromasil—IOOC 柱，流动相为0．05mol／L NaH2PO 缓冲液一乙腈(6．4：1)，马钱素和莫诺苷的平均回收率分别为99．79％和99．73％(n=6)。可作为山茱萸注射液质量控制方法。

1．1．2 RP—HPLC法测定熊果酸含量《中华人民共和国药典》(2000年版)采用索氏提取、薄层色谱分离，用薄层扫描法测定山茱萸有效活性成分熊果酸的含量。该法操作繁琐，且费时间尹小英等采用超声波提取、高效液相色谱法测定熊果酸．具有精密度高、检测速度快、分离效果好、重现性好等特点．通过比较．二者所测得含量基本一致，证实后者取代前者是完全可行的

1．1．3 RP—HPLC法测定没食子酸含量采用C 柱，流动相为水一乙酸(98：2)。紫外检测波长272nm，结果没食子酸检测线性范围为0．4 101~g。最小检测限为6ng，重现性试验RSD 为0．48％，精密度试验RSD 为0．38％，平均回收率100．7％， RSD 为2．58％t~。采用此法测定浙江、北京、安徽、陕西、河南等产地的山茱萸药材．发现北京药材没食子酸含量最高，达 0．24％．而久置的浙江、陕西药材含量仅有北京药材的一半；浙江产采集时期不同的样品。久置者没食子酸含量有所下降。本法灵敏度高、重现性好。可作为评价山茱萸药材质量的一种方法。

1．2 气相色谱法山茱萸核粗粉40g，置索氏提取器中，乙醚浸泡24h后提取5h，挥尽乙醚后称取1g，先用硫酸一甲醇混合液进行甲酯化．再用气相色谱仪测定脂肪酸的种类与含量。结果表明，山茱萸核的油酯中含有月桂酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸等，不饱和脂肪酸含量很高。在90％以上。其中亚油酸占7l％左右。提示该核油可能具有重要的药用价值

1_3 薄层扫描法采用双波长薄层扫描法对山茱萸中熊果酸及齐墩果酸的成分进行分析。结果表明．其熊果酸的平均含量和RSD分别为0．1732％、0．18％：齐墩果酸分别为0．2418％、 2．14％王晓红17]采用双波长薄层扫描法测定山茱萸几种炮制品中熊果酸含量，结果表明，生品与酒制品、醋制品、盐制品的含量变化不大，而蒸制品含量有所下降，依次为：酒制品 (0_32％±2．6％)>生品(3．1％±1．8％)>醋制品(O-3O％±1．7％)>盐制品(0．29％~1．7％)>蒸制品(0．25％±2．3％)。酒制品的含量比生品略有增加．是否酒增加熊果酸的溶出，有待进一步研究。蒸制过程是否使熊果酸损失，也值得进一步研究。

2 药理作用

2．1 降血糖山茱萸有抗糖尿病作用悯．其醇提取物不仅对四氧嘧啶和肾上腺素性糖尿病大鼠有明显的降血糖作用．而且对链脲佐菌素(STZ)所形成的糖尿病大鼠也有类似作用。但对正常大鼠血糖无明显影响．并进一步弄清其有效的主要成分为熊果酸。提示山茱萸对I型(胰岛素依赖性)糖尿病患者可能有一定的治疗作用[91。此外．山茱萸乙醇提取液能显著降低Ⅱ型(非胰岛素依赖型，NIDDM)糖尿病大鼠进食量及饮水量．其对NIDDM 大鼠空腹血糖无影响，但能明显降低其进食后血糖水平．升高进食后血浆胰岛素水平．提示对Ⅱ型糖尿病患者亦有相当的治疗作用。用大鼠的副睾脂肪组织进行实验，发现山茱萸有胰岛素样作用，其鞣酸能抑制脂质过氧化。山茱萸对体外蛋白质非酶糖基化有抑制作用．能改善糖尿病慢性并发症环烯醚萜总苷能显著降低糖尿病血管并发症模型大鼠sICAM一1、TNF—a水平．部分恢复NO和ET的动态平衡，保护血管内皮细胞．对糖尿病血管并发症具有改善作用llOl。

2．2 抗失血性休克用水煮醇沉法将山茱萸制成静脉注射液(1g／mL)．给失血性休克的家兔按36滴／rain的速度颈外静脉点滴半小时或lmL／kg耳静脉注入，隔lOmin1次，共5次，对照组以等量NS同种方法注入结果实验组血压均迅速回升．回升的幅度及血压心搏波振幅平均增值均明显高于对照组【ll】将山茱萸注射液应用于失血性休克大鼠及家兔(2mL／ kg)．在足量补液的条件下，均能延长生存时间，当补回全部失血量时作用尤其明显．大鼠血压下降时间大为延长。 2．3 抑制血小板聚集在深入探讨山茱萸注射液抗失血性休克的过程中．发现山茱萸注射液体外给药能明显抑制阈浓度二磷酸腺苷(ADP)钠盐胶原或花生四烯酸诱导的兔血小板聚集．抑制作用随其用量加大而增强．剂量与效应相关；静脉给药也表明其能抑制ADP诱导的兔血小板聚集．说明整体与离体试验结果一致此外．山茱萸注射液还能抑制大鼠颈总动脉一颈外静脉旁路循环的血栓形成抑制血小板聚集及抗血栓形成．对缓解DIC有一定意义．这亦是山茱萸注射液治疗休克的机制之一。

2．4 对免疫系统的影响山茱萸水煎剂能使小鼠胸腺明显萎缩．减慢网状内皮系统对碳粒的廓清速率．能抑制SRBC或 DNCB所致小鼠迟发性超敏反应和减轻DNCB所致的接触性皮炎．但是．它能升高小鼠血清溶血素抗体和血清抗体IgG含量【13】同时发现山茱萸中的糖类有明显促进免疫反应的作用。熊果酸在体外能快速有效地杀死培养细胞．使培养淋巴细胞几乎完全失去淋转、白细胞介素生成及LAK细胞f淋巴因子激活的杀伤细胞)产生的能力：但腹腔注射熊果酸的小鼠上述 3种免疫指标均明显提高．无论体外还是体内．合适浓度的马钱素则对这3种指标均有促进作用．高浓度则有抑制作用山茱萸总苷可抑制T、B淋巴细胞增殖．抑制T淋巴细胞产生 IL一2、T淋巴细胞膜表面CD 、CD 、CD 的表达及提高CDJCD 的比值㈣；明显抑制rTNF—A和rIL一1诱导ECv 表达黏附分子ICAM一1和CD 表达，并呈明显的量效关系；总苷部分对小鼠混合淋巴细胞反应的抑制效应除剂量外．还与刺激和反应淋巴细胞来源小鼠种系有关．推测总苷部分影响主要组织相容性抗原

2．5 抗炎作用山茱萸水煎剂能抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性的增高、大鼠棉球肉芽组织的增生、二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀以及蛋清引起的大鼠足垫肿胀．并能降低大鼠肾上腺内抗坏血酸含量．证实了该药的抗炎效果发现山茱萸总苷不仅能抑制由角叉菜胶所致的大、小鼠非特异性足跖肿胀，对弗氏完全佐剂所致的免疫性炎症模型一大鼠佐剂性关节炎也有显著抑制作用，这与上述的总苷具有免疫抑制作用是一致的

2．6 抗氧化作用山茱萸可减轻自由基对机体造成的损害．具有较强的抗氧化能力。在Wistar大鼠颈背部注射D一半乳糖人为建立衰老模型，模型组大鼠抗氧化能力下降．表现为RBC 内SOD 活力下降(P
2．7 抗肿瘤作用山茱萸体外能杀死腹水癌细胞以山茱萸煎剂做实验，并用正常唾液腺细胞和精巢细胞作对照．结果显示：山茱萸体外能杀死全部小鼠腹水癌细胞．对精巢细胞亦有同样作用，但仅小部分杀死唾液腺细胞对于因化学疗法及放射疗法引起的白血球下降．有使其升高的作用。

2．8 抗艾滋病作用美国加利福尼亚州中医研究所和克鲁斯医学研究所经长期实验研究证实山茱萸具有抗艾滋病的功能[171。

3 结语

山茱萸是国家40种用量较大的重点药材之一。在山茱萸属中．供药用除韩国有少量分布外。主要分布在我国的河南、浙江、陕西等省。历年来，山茱萸主要以果肉直接入药，比较单一．应加强对营养补品、保健饮料、药酒、副食品等系列产品的研究与开发山茱萸中含有多种维生素、矿物元素、有机酸和氨基酸．这些物质在生命活动中都具有重要的功能。因此，山茱萸可起到非常重要的治疗和保健作用。山茱萸不仅具有很高的营养价值．资源丰富．而且具有调节机体功能和抗疲劳的保健作用．将其开发成方便的保健食品，会产生良好的经济、社会和生态效益.

产品目录

白果内酯

银杏内酯A

银杏内酯B

银杏内酯C

穿心莲内酯

脱水穿心莲内酯

去氧穿心莲内酯

新穿心莲内酯

大黄酚

大黄素

大黄素甲醚

大黄酸

芦荟大黄素

黄芩苷

黄芩素

汉黄芩素

汉黄芩苷

原儿茶醛

原儿茶酸

淫羊藿苷

柚皮苷

柚皮素

盐酸水苏碱

盐酸小檗碱

小檗胺

绿原酸

芦丁

木犀草素

苦参碱

氧化苦参碱

齐墩果酸

青蒿素

芹菜素

染料木素

山奈酚

熊果酸

白藜芦醇

人参皂苷Rb1

人参皂苷Re

人参皂苷Rg1

人参皂苷Rg3

白杨素

水飞蓟宾

橙皮苷

虎杖苷

槲皮素

厚朴酚

和厚朴酚

蛇床子素

天麻素

青藤碱

秋水仙碱

葛根素

槐定碱

丹酚酸B

隐丹参酮

丹参酮IIA

水杨苷

栀子苷

莽草酸

甘草酸

丹皮酚

大豆苷元

原花青素

吴茱萸碱

黄芪甲苷

芍药苷

莪术二酮