制备方法

1.传统的黄连素提取工艺

（1）以黄连为原料的提取工艺

  1）硫酸法

称取10g药黄连剪碎,磨烂,加入盛有100mL,0.5%H2SO4溶液的烧杯中加热煮沸约5min后静置浸取20h,抽滤,提取液加食盐饱和,用稀盐酸调pH值至1～ 2,放置5h即析出盐酸黄连素粗品。抽滤,将粗品加热水至刚好溶解煮沸,用石灰乳调节pH值为8.5～ 9.8。冷却,滤除杂质,继续冷却至室温以下即有黄连素结晶析出。抽滤,得到黄色小蘖碱结晶,在50～ 60℃的烘箱中烘干。

  2）石灰水法

将黄连10g粉碎成粉状,加1/10量的生石灰细粉,再加50倍的冷水浸泡,并经常搅拌,24h后过滤得棕红色滤液(滤饼还可再次浸取),加入滤液量5%食盐水,搅拌使之溶解,黄连素使在盐水溶液中沉淀析出,待沉淀完全后过滤,滤饼即为黄连素,在50～60℃下干燥。

  3）乙醇法

称取10g中药黄连切碎,研磨成粉状,放人250mL圆底烧瓶中,加人100mL乙醇,装上回流冷凝管,热水浴加热回流0.5h,静置溶泡1h,抽滤,滤渣重复上述操作处理两次,合并3次所得滤液,在水泵减压下蒸出乙醇(回收)直到棕红色糖浆状。再加入1%醋酸(约30～ 40mL)加热溶解,抽滤以除去不溶物,然后于溶液中滴加浓盐酸至溶液浑浊为止,放置冷却,即有黄色针状体的黄连素盐酸盐析出,抽滤,结晶用冰水洗涤两次,再用丙酮洗涤一次,然后将粗品加热水至刚好溶解煮沸,用石灰乳调节pH值为8.5～ 9.8。冷却,滤除杂质,继续冷却至室温以下即有黄连素结晶析出。抽滤,得到黄色小蘖碱结晶,在50～60℃的烘箱中烘干。

（2）以黄柏为原料的提取方法:

  1）酸醇原法：称取黄柏细粉100g,酸醇溶液500mL,回流1～ 2h,过滤,滤渣重复抽提2次,滤液在不断搅拌下加入固体工业食盐(为总体积的10%),用生石灰调pH值为9～ 10,过滤,搅拌、静置;过滤干燥得粗品,经水重结晶,而获得精品。

  2）碱提取法：称取黄柏粗粉100g,适量石灰乳浸渍12h后用水收集滤液,加入固体工业食盐(为总体积的10%),加入石灰乳调pH值为8～ 9,过滤、搅拌溶解、冷藏过夜,取沉淀加热水溶解,趁热过滤,滤液加浓HCl调pH值为1～ 2,冷藏12h,取沉淀用蒸溜水洗至pH值为5,在60℃以下干燥,再重结晶,而获得精品。

  3）醇提取法：称取黄柏粗粉100g,用75%乙醇连续回流提取至几乎无色,提取液减压回收乙醇后,用热水溶解,趁热过滤,其它同碱提取法。

2.新的提取工艺

（1）液膜法提取黄连素

黄连水浸液的制备:称取用粉碎机粉碎的黄连干粉。用蒸馏水浸泡48h,用循环水真空泵抽滤。滤液用蒸馏水定容至一定体积(母液)。供实验用。
液膜的制备方法按实验所需液膜要求,先将乳化剂Span 80溶于煤油中。然后加入盐酸溶液。采用恒温磁力搅拌器中速搅拌10min。即可得到亚稳定的白色乳状液膜。

黄连素的提取方法将10mL液膜倒入已调好pH值的30mL母液中,慢速搅拌10min,用分液漏斗分出已吸收黄连素的黄色液膜层,倒入烧杯中.然后再向调好pH值的已分离一次后的母液中加入10mL液膜,慢速搅拌10min。用分液漏斗分出已吸收黄连素的黄色液膜层,倒入装有黄色液膜层的烧杯中,在恒温水裕锅(80℃)进行破膜、静置、过滤,得产品。

（2）超声波提取黄连素

将黄柏5g碎成粉状,置烧杯中,加入1/10量的生石灰细粉,加水溶胀30min后,再加入30倍量水浸泡24h后纱布过滤,再用10%的盐酸将滤液pH值调至2～ 3,然后加入滤液体积10%的NaCl,放置过夜后抽滤,得到盐酸小檗碱的粗提物,此时还含有杂质。将盐酸小檗碱的粗提物用热水溶解并趁热抽滤,滤液冷却静止1h抽滤得到盐酸小檗碱与掌叶防己碱等的混和物。取粗产品各5g,粉碎加入130mL石灰水和20mL 5ms/mL的酶液,在60℃ ,功率为60%的超声波清洗器里超声清洗90min后双层纱布过滤,滤液用10%的盐酸调pH值为2～ 3,最后加入滤液体积10%的NaCl,放置过夜,抽滤,得两组盐酸小檗碱