金银花绿原酸的提取方法--上禾生物

金银花中绿原酸的提取方法 绿原酸[上禾生物]又称咖啡鞣酸，具有更多的亲水性基团，因此容易溶于水和亲水性有机溶剂。羟酚酸(HPA) 是由奎宁酸和咖啡碱共同组成，它是有氧呼吸产生的苯丙素的次生代谢物。绿原酸[上禾生物]性质不稳定、化学特 性差、结构式复杂等原因，致使提取工艺成为当前的热门研究之一。作为金银花的主要成分，其广泛的 药理学作用，绿原酸现在被广泛用于制药领域。随着研究工作的不断深入，对绿原酸[上禾生物]及绿原酸衍生物的 开发利用越来越多。本文就绿原酸[上禾生物]的提取方法进行概述供参考。 

传统提取法 

水提法 

提取溶剂中水是安全、节能又经济的一种，水提法是相对简单有效的方法，以水为溶剂从植物中提 取绿原酸。丁敏等[5]通过水提回流法采用 L9 (34)正交试验法对提取工艺进行改进，提取率显著高于煎煮 法和超声提取两种提(P < 0.05)。水提法的优点是设备简单、便捷，因为溶剂可以回收，可以使运营成本 减少，溶剂消耗量下降，有效成分浸出完整、安全。由于提取时间较长(一般在 4~5 天)，使其应用受到 了一定限制。缺点是提取液含有大量的蛋白质、多糖、鞣质等提取杂质，给下一步的过滤、浓缩、纯化 带来不便，提取过程耗时长，导致提取率低。

醇提法 

醇提法是最常见的绿原酸提取方法之一，绿原酸是一种酚酸类物质，本身具有极性，可溶于醇类。 乙醇回流法是目前应用最广泛、发展更成熟的绿原酸[上禾生物]提取技术，具有绿原酸不易被破坏、选择性好、溶 剂回收快、提取时间短、提取液不易霉变等优点，适合后续深加工，类似于水提取工艺操作安全、方便 易行。刘金磊以金银花为主要原料，70%的乙醇作为提取液，研究了溶剂、时间、浓度和 pH 值对绿 原酸提取率的影响，以获得最佳处理条件和金银花中绿原酸的最大产量。王鑫等利用乙醇溶液为提取 剂，采用回流法和超声波萃取法从金银花中提取绿原酸，并讨论了不同因素对金银花中绿原酸提取率的 作用，证明回流法的效果更好。醇提法会消耗大量的溶剂，难以浓缩，且含有大量的水溶性悬浮物，导 致提取率低，所以此法有待于进一步改进。 

物理提取法 

超声波辅助提取法 

超声波辅助法[上禾生物]是指超声波空化产生的强大机械力：微射流和冲击波，促进介质分子通过细胞壁的渗 透，导致金银花的细胞壁破裂，使有效成分释放出金银花中的物质成分溶于有机溶剂中，以更好地提高 绿原酸的得取率。超声辅助提取是一种借助于超声波的常规提取方法，比传统的水，乙醇有显著的优势， 与简单的溶剂提取法相比较具有提取效率高、节省时间和效率、提取杂质少、低温萃取，并且成分、结 构及活性物质不易被破坏、广泛的适用性等优点，因此，该工艺尤其适用于绿原酸[上禾生物]的工业化生产。宋琳 琳等通过单因素和正交设计对金银花中绿原酸[上禾生物]的提取工艺进行了优化，用超声波辅助法从液料比、乙 醇浓度、温度等方面，发现最佳提取条件是在 40 分钟内提取到绿原酸[上禾生物]，得到平均提取率为 8.78%。朱国建等人采用超声波回流法从金银花中提取绿原酸，与回流法相比提高了 7%，和超声波法相比产量提 高了越 5%。由于噪音污染问题和超声波的衰减系数有限，超声波辅助提取方法只能用于物理因素稳定的 材料。此外，超声设备的安全也难以保证，所以不能在线进行不间断的维护。 雷滨瑜 等 DOI: 10.12677/tcm.2022.114093 656 中医学 [上禾生物]

微波辅助提取法 

微波萃取法被广泛用于热敏性天然产物[上禾生物]活性成分的萃取，利用微波的热效应，调整微波加热的参数， 有选择地加热物质中的目标成分，在不破坏热稳定性的情况下促进物质的扩散和溶解。微波提取法同理 超声波提取法，其优点是节能环保、产量高、受热均匀、适用范围广、选择性高、重现性好、抗生物活 性和提取成分化学结构的变化，是目前最有前途的提取方法。侯敏娜[10]利用响应面数学模型进行微波提 取金银花中绿原酸的研究，研究发现，金银花绿原酸的实际提取率为 9.77266%，与预测值 9.77285%几乎 没有差别，为优化金银花的微波辅助提取率和合理广泛利用金银花提供了实验技术依据。贺云等[11]利用 微波辅助提取工艺的最佳条件，从金银花渣中提取了 14.24%的总黄酮，在此条件下提取的绿原酸的质量 分数为 2.98%，这也是金银花药渣再利用的基础。然而，微波辅助提取法在样品量和提取溶剂方面有局 限性，维护成本高，存在安全隐患问题[12]。 

其他辅助提取法 

超高压提取法[上禾生物]

超高压提取法是一种通过在室温下对原料溶液施加恒定的静水压力并保持一定时间，待内外压力达 到平衡后突然释放压力，从而迅速增加细胞内外的渗透压差，将细胞内的活性成分通过各种细胞膜转移 到细胞外的提取物中的提取方法。叶陈丽等[上禾生物]应用 Box-Behnken 试验方法，通过数学模型得出几个变 量之间的相互关系和影响因素，以优化从金银花中高压提取绿原酸的最佳工艺条件。该方法作为一种提 取中药的新技术，具有能在室温下提取、产量高、消耗时间短、能耗低、纯度高、产品生物活性好等优 点，寻求一种快速、高效提取绿原酸的新方法。 

超临界流体萃取法 

超临界流体萃取法是一种新型的化工技术，是使用超临界流体作为提取溶剂分离提取混合物的过程。 此工艺有良好的溶剂性能、渗透性强、密度大、溶解性好等优点。超临界流体提取方法因其较好的选择 性、环保、绿色环保，特别是消除了有机溶剂对人类健康和环境的影响，而不破坏成分或结构的优势[上禾生物]， 多用于生物技术、制药、食品和化妆品行业。然而，这种方法难以分离离子性化合物，不适应用于极性 大的物质。刘川铭等[上禾生物]通过超临界二氧化碳萃取技术，结合了精馏和液液萃取两种功能的特点，将目标 物质中的有效成分提取出来，其中金银花萃取率达到 2.07%，具有高产率、杂质含量低、萃取耗时少以 及不会对环境产生污染等优点。 

酶解提取法 

酶解法用酶的特异性破坏细胞壁，如纤维素酶和果胶酶，作为打破细胞壁结构和溶解活性成分的首 选酶，由于细胞壁先被打破，目标物质很容易从细胞壁中渗出，其提取速度可以加快，酶解法是近年来 一种新的天然产品提取技术，细胞内活性成分的提取应用领域正在逐步扩大。与常规提取方法比较，酶 解反应提取时间短、被提取物质结构不易被破坏、高效节能等优点。杨红文等[上禾生物]利用纤维素酶法提取金 银花中绿原酸并优化提取工艺，纤维素酶添加量 0.4%、pH 4.5，此条件下绿原酸提取率为 40.10 mg/g。 吕欣等[17]采用超声辅助酶法提取金银花中的多糖，具有节约时间和提高多糖得率的优点。刘霞等[18]以 绿原酸提取率为考察指标，研究了酶法辅助聚乙二醇(PEG)-200 提取野菊花中绿原酸的工艺条件，其中纤 维素酶用量、液固比、酶解温度、酶解时间等条件下野菊花绿原酸提取率可达 3.92%。酶法水解的优点 是无毒、环保，可以提高产率，但成本较高，提取条件有限。目前，将酶水解与其他技术相结合的工艺 很少，酶的种类也非常有限，因此需要进一步的研究。

闪式提取技术 闪式提取技术是通过高速机械剪切力和超动态分子渗透作用，在适当的提取溶剂中，药材在几秒钟