根皮苷的提取和分离纯化 |
发布时间:2023-01-07 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:165 |
提取和分离纯化1. 根皮苷的提取 根皮苷难溶于水,易溶于有机溶剂。传统方法多是应用有机溶剂提取,现在多为超声波辅助提取法、微波辅助提取等方法。以苹果枝为原料,用10倍量水做溶剂提取根皮苷2次,开放大孔树脂层析,用乙醇梯度洗脱。将粗提的根皮苷合并利用中低压制备色谱,ODS为填料,甲醇和水(3∶7)进行洗脱,将浓缩产物合并重结晶,以此得到纯品。 用HPLC色谱法检查,结果表明样品纯度达到98%以上。徐凯等通过超声波法、微波法等多种方法比较,最终确定了采用L16(43)正交实验筛选的最优提取工艺为:用红富士苹果为原料,40%乙醇溶液为提取溶剂,料液比为1∶30,回流提取1h,得到了最佳提取效果。在丰金玉等的研究结果中,发现利用超声波辅助提取根皮苷时,提取温度为45℃,提取溶剂为70%乙醇溶液,加30倍量的溶媒提取35min效果最佳。因为提取出来的根皮苷含量普遍较低,因此需要进一步的除杂和分离纯化的过程才能得到纯度较高的根皮苷。 2. 根皮苷的分离纯化 有文献指出,根皮苷的纯度之所以很低,是因为多穗石柯植物中含有较多的黄酮类和类黄酮类化合物,且其结构复杂,衍生物较多,杨大坚等鉴定出甜茶中3种主要的二氢查尔酮类物质依次是根皮苷、三叶苷、3-羟基根皮苷。目前,在现有的文献中可以总结出分离根皮苷的方法有大孔树脂吸附法、壳聚糖絮凝法、高效离心分配色谱法(HPCPC)、聚酰胺层析柱分离、萃取法等。李胜华等证明了D101型大孔树脂对根皮苷的分离纯化效果最佳,其纯度可以达到95.6%。 Sun L等的研究中先后利用X-5和聚酰胺树脂分离表儿茶素、金丝桃苷、根皮苷,其分离纯度可达到95%以上,该方法不仅方便成本低,而且还减轻移种。王慧莹利用壳聚糖絮凝法,得到的根皮苷的质量分数21.7%,与验证试验结果接近,壳聚糖无需加热、节约资源等优点更适合工业大规模运用。李荣涛等首次利用HPCPC色谱法对苹果树枝醇提物进行分离纯化,得到了根皮苷纯度高达91.2%,高效离心分配色谱法具有高效、快速、回收率高和负载力高等优点。总体来讲,不同的方法均能分离纯化得到纯度较高的根皮苷,可结合自身情况选择方法达到实验目的。 主要参考资料[1] 营养科学词典 [2] 王睿,吴飞,赵春草,李更青,胡小苏,张继全.根皮苷的分离纯化及药理研究进展[J].中华中医药杂志,2019,34(04):1605-1608. |