杜仲提取物对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响 | 杜仲提取物对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响 |
| 发布时间:2012-02-19 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:2510 |
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【摘要】 目的：观察杜仲提取物对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响。认识杜仲“甘，温，入肝、肾经”药性的现代科学内涵。方法：采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成小鼠肾阳虚模型。ICR雄性小鼠72只，随机分为对照组，模型组，桂附地黄丸组，杜仲水提取物组、正丁醇提取物组、乙酸乙酯提取物组，共6组，每组12只。对小鼠体征、肛温、抓力、游泳时间、自主活动、血清肌酐（Cr）及尿素（UR）、血液学指标、睾丸和精囊腺指数进行测定。结果：杜仲水提取物能提高肾阳虚小鼠肛温、游泳时间、自主活动、睾丸和精囊腺指数、Hb、WBC、LY、MO、PLT，降低UR；正丁醇提取物能提高小鼠抓力、游泳时间、自主活动次数、睾丸和精囊腺指数、RBC、Hb、WBC、LY、MO、PLT，降低UR；乙酸乙酯提取物能提高小鼠肛温、抓力、精囊腺指数、Hb、PLT，降低Cr、UR。结论：杜仲的药理作用可作为改善肾阳虚证之腰膝酸软、性欲减退、畏寒肢冷、精神萎靡、阳虚水泛，以及肾精亏虚、肝气虚弱所致血液亏虚的基础；并作为其“甘，温，入肝、肾经药”药性现代科学内涵的组成部分。杜仲水提取物和正丁醇提取物的作用较为接近且较强。 【关键词】 小鼠肾阳虚 杜仲提取物 性味归经 杜仲叶提取物 长沙上禾生物 杜仲绿原酸 Effects of Cortex Eucommiae Extracts on Estradiolinducecd Kidneyyang Deficiency Mice FAN Jing, et al. Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou (310053), China Abstract Objective:To observe the effects of extracts from Cortex Eucommiae on estradiolinduced kidneyyang deficiency in mice and to understand the modern scientific connotation of the properties theories about sweetflavor, warmnature, meridian tropism in liver and kidney. Methods:Kidneyyang deficiency mice model was established with intraperitoneal injection of estradiol benzoate. A total of 72 healthy adult male ICR mice were randomly divided into 6 groups: control group, model group, positive control group (Guifudihuang), and 3 groups of Cortex Eucommiae (water extract, nbutanol extract, and acetoacetate extract), 12 mice in each group. The effects were observed by measuring physical sign, rectal temperature, grip strength, swimming time, locomotor activity, serum creatinine and urea levels, haematological indexed, testis index and seminal vesicle index. Results:The water extract markedly improved the rectal temperature, swimming time, locomotor activity, testis index, seminal vesicle index, Hb, WBC, 中国《药典》2005年版记载，杜仲味甘，性温，归肝、肾经，功能补肝肾、强筋骨、安胎，用于肾虚腰痛、筋骨无力、胎动不安等。《神农本草经》谓杜仲“主腰脊痛，补中益精气，坚筋骨，强志……久服轻身不老”。杜仲可用于治疗各种肾阳不足所致之证。为探讨其性、味、归经的现代科学内涵，开展如下研究。 1 实验材料 1.1 药 物 盐杜仲，批号080110，购自浙江中医药大学中药饮片厂，经鉴定为杜仲科植物杜仲Eucommiaulmoides Oliv.树皮的炮制品。药材先制成水提取物；再取药材用10倍体积95%乙醇提取2次，分别制成乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物。水、正丁醇、乙酸乙酯提取物分别加吐温80稀释至 1.2 试 剂 肌酐、尿素试剂盒（Cr、UR，上海复兴长征医学科学有限公司，批号P071254、P080431）。血液分析试剂（美国A Drew Scientific Group Co.，批号5018）。苯甲酸雌二醇（上海通用药业股份有限公司，批号070902）。桂附地黄丸（兰州太宝制药有限公司批号，80080542）。绿原酸（长沙上禾生物）杜仲提取物（长沙上禾生物） 1.3 动 物 ICR小鼠，雄性，体重18～ 1.4 仪 器 HEMAVET950动物血液分析仪（美国A Drew Scientific Group Co.）；XZ4型5光道小鼠自发活动自动记录仪、YSL 2 实验方法 2.1 造模与给药 健康ICR雄性小鼠72只，随机分为对照组，模型组，桂附地黄丸组，杜仲水提取物组、正丁醇提取物组、乙酸乙酯提取物组，共6组，每组12只。除对照组外，其余5组按0.1mL/ 3 实验结果 3.1 对一般体征的影响 对照组小鼠皮毛干爽光滑，精神状态良好，喜动而不喜卧。模型组小鼠皮毛汗湿竖立，精神萎靡，弓背萎缩，喜挤卧而不喜动。杜仲提取物各组在实验前期（给药第1～7天）也出现与模型组小鼠相同体征，但在实验后期（给药第8～15天）逐渐恢复正常。 3.2 对肛温的影响 给药前各组间肛温无明显差异。与对照组比较，给药第12天，模型组肛温明显降低（P<0.01），说明体温下降造模成功；与模型组比较，杜仲水提取物组和乙酸乙酯提取物组肛温明显升高（P<0.05），正丁醇提取物对肛温有升高趋势。结果说明杜仲具有升高肾阳虚小鼠肛温的作用，见表1。表1 各组小鼠肛温比较与对照组比较， 3.3 对游泳时间的影响 给药前各组间游泳时间无明显差异。与对照组比较，给药第13天，模型组游泳时间显著减少（P<0.01），说明腰膝酸软造模成功；与模型组比较，桂附地黄丸组、杜仲水提取物组和正丁醇提取物组游泳时间明显延长（P<0.05）。结果说明杜仲可能有改善腰膝酸软的作用，见表2。 3.4 对抓力的影响 给药前各组间抓力无明显差异。与对照组比较，给药第14天，模型组小鼠抓力显著减弱（P<0.01），说明腰膝酸软造模成功；与模型组比较，桂附地黄丸组、杜仲正丁醇提取物组和乙酸乙酯提取物组小鼠抓力明显增强（P<0.01～0.05）。结果说明杜仲可能具有改善腰膝酸软的作用，见表3。表2 各组小鼠游泳时间比较（±s）表3 各组小鼠抓力比较 3.5 对自主活动的影响 给药前各组间自主活动无明显差异。与对照组比较，给药第15～16天，模型组小鼠自主活动次数明显减少（P<0.01），说明精神萎靡造模成功；与模型组比较，桂附地黄丸组、杜仲水提取物组和正丁醇提取物组自主活动次数显著增多（P<0.01）。结果说明杜仲可能有改善肾阳虚小鼠精神萎靡的作用，见表4。 3.6 对Cr、UR水平的影响 ①与对照组比较，模型组Cr有升高趋势；与模型组比较，杜仲乙酸乙酯提取物组Cr明显降低（P<0.05），水提取物组和正丁醇提取物组Cr有降低趋势。②与对照组比较，模型组UR显著升高（P<0.01）；与模型组比较， 桂附地黄丸组、杜仲水提取物组、正丁醇提取物组和乙酸乙酯提取物组UR明显降低（P<0.01）。结果显示杜仲具有改善肾阳虚小鼠肾功能的作用，见表5。表4 各组小鼠自主活动比较表5 各组小鼠Cr、UR水平比较 3.7 对血液学指标的影响 ①与模型组比较，杜仲正丁醇提取物明显升高RBC（P<0.01），水提取物、正丁醇提取物和乙酸乙酯提取物显著升高Hb（P<0.01～0.05）。②与模型组比较，杜仲水提取物和正丁醇提取物明显升高WBC、LY、MO （P均<0.05）。③与模型组比较，桂附地黄丸组、杜仲三个提取物都显著升高PLT（P<0.01～0.05）。结果表明杜仲各提取物能不同程度影响肾阳虚小鼠血液学指标，见表6～8。表6 各组小鼠红细胞参数比较表7 各组小鼠白细胞参数比较表8 各组小鼠血小板数比较 3.8 对睾丸、精囊腺指数的影响 结果显示，①与对照组比较，模型组睾丸指数明显减小（P<0.01）；与模型组比较，杜仲水提取物组和正丁醇提取物组睾丸指数显著升高（P<0.01～0.05），乙酸乙酯提取物组有改善趋势。②与对照组比较，模型组精囊腺指数明显减小（P<0.01）；与模型组比较，桂附地黄丸组、杜仲水提取物组、正丁醇提取物组及乙酸乙酯提取物组精囊腺指数皆显著升高（P均<0.01）。结果说明杜仲可能有改善肾阳虚小鼠性欲减退的作用，见表9。表9 各组小鼠睾丸、精囊腺指数比较 4 讨 论 参考国家技术监督局发布《中医临床诊疗术语》，肾阳虚证的主症有腰膝酸软，性欲减退，畏寒肢冷；次症有精神萎靡，夜尿频多，下肢浮肿，动则气促，发槁齿摇，舌淡苔白，脉沉迟，尺无力。具备以上主症2项、次症2项，即可诊断为肾阳虚证。 腰膝酸软症状目前尚无相应的客观指标考察。本实验采用小鼠抓力减小和游泳时间缩短反映该症。结果杜仲正丁醇提取物能不同程度提高小鼠抓力和游泳时间，水提取物能延长游泳时间，乙酸乙酯提取物能提高抓力。这些作用可能与杜仲甘温入肾，能温阳、补肝、益肾作用有关。目前多用交配能力、血清性激素水平、生殖器官指数等指标考察性欲冷淡症[3～5]。 本实验观察了小鼠睾丸、精囊腺指数，结果显示，杜仲水提取物和正丁醇提取物能不同程度升高小鼠睾丸、精囊腺指数，乙酸乙酯提取物能升高小鼠精囊腺指数。这些作用可能与杜仲甘温入肾，能温补肾阳，填精益肾作用有关。由于暂缺可精确测量动物四肢温度的仪器（预试验采用红外测温仪，结果误差大），故本实验观察小鼠肛温。实验结果，杜仲水提取物和乙酸乙酯提取物能不同程度提高小鼠肛温。这可能与杜仲性温，能温阳散寒作用有关。本实验采用自主活动次数来反映[6]精神萎靡症状。实验结果，杜仲水提取物和正丁醇提取物能不同程度增加小鼠自主活动次数。这可能与杜仲性温，能温补阳气作用有关。阳虚水泛为肾阳虚兼证之一。本实验采用小鼠血清Cr、UR水平升高反映该证[7]。结果显示，杜仲三种提取物都能不同程度降低Cr、UR水平。这些作用可能与杜仲性温，能温阳行气利水有关。 肾精亏虚致化血无力，肝气虚弱致肝不藏血，从而导致血液亏虚。本实验采用血液学指标变化反映该证。结果显示，杜仲三种提取物均能升高Hb、PLT，杜仲水提取物和正丁醇提取物能不同程度升高WBC、LY、MO，正丁醇提取物还能升高RBC。这些作用可能与杜仲甘温入肝肾，能补肾填精，温阳益气作用有关。 比较杜仲水提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物作用发现，杜仲水提取物和正丁醇提取物的作用接近且较强，为甘，温，归肝、肾经共同药效物质群提供了启示，有待进一步分析性、味、归经等药性与药效及化学物的关系。 【参考文献】 1 苗明三，朱飞鹏.常用医药研究动物模型.北京:人民卫生出版社，2007.405 3 戈士文，高元法，邓占元，等.五子衍宗丸主要药效学的实验研究.中医研究，2003，16(5):19长沙上禾生物 www.staherb.com 20 4 李春生，张国玺，石体仁，等.山茱萸水提取物对肾阳虚动物模型肝脏和睾丸影响的实验研究.中国中药杂志，2003，28（8）:743747 5 李震，贾素菊，王华云，等.应用诱导劳倦过度、房室不节法建立肾阳虚模型的研究.山东中医学院学报，1994，18(6):418419 6 冯海莲，黄秀梅，王宁萍.考察复方锁阳胶囊的温肾助阳作用.中成药，2005，27（1）：103105 7 赵洪钧.三种小鼠“肾虚”模型的生化指标比较研究.中国中医基础医学杂志，1997，3(5):6061 长沙上禾生物 www.staherb.com |
