本方法采用薄层扫描法测定二至丸中齐墩果酸的含量。

本方法适用于中成药二至丸。

供试品于索氏提取器中经醋酸乙酯加热回流提取，过滤，滤液蒸干，残渣用醋酸乙酯溶解，制成供试液，点样、展开，以10%硫酸乙醇溶液显色，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λs=530nm，λ_R=680nm测量齐墩果酸（C₃₀H₄₈O₃）吸收度积分值，计算其含量。

1 醋酸乙酯

2 无水乙醇

3 乙醇

4 丙酮

5 环己烷

6 硫酸 10％硫酸乙醇溶液

1  仪器

1.1索氏提取器

1.2薄层扫描仪

1.3涂布器 

应能使吸附剂在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

1.4点样器 

一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。

1.5展开室 

可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。

2  材料

2.1玻板 

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。

2.2吸附剂 

硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。

1.对照品溶液的制备

精密称取齐墩果酸对照品适量，加无水乙醇制成每1mL含1mg溶液，作为对照品溶液。

2.供试品溶液的制备

取供试品，研碎，精密称取约0.5g，置索氏提取器中，加醋酸乙酯适量，加热回流提取6小时，提取液回收醋酸乙酯至干，残渣加醋酸乙酯使溶解，转移至 5mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.薄层板制备 

将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25～0.5mm）取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用，或用商品预制板。

2.点样 

精密吸取供试品溶液 2μL、对照品溶液 1μL与 4μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

3.展开 

将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以环己烷一丙酮一醋酸乙酯（5：2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点清晰，取出。

4.含量测定

在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，进行扫描，波长：λs=530nm，λ_R=680nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。

用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如不通过原点通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编、化学工业出版社，2005年版，一部p.293。