方法名称：

 六味地黄丸—丹皮酚的测定—高效液相色谱法

应用范围：

   本方法采用高效液相色谱法测定六味地黄丸中丹皮酚的含量。

    本方法适用于中成药六味地黄丸。

方法原理：

本品加50%甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长274nm处检测丹皮酚的吸收值，计算出其含量。

试剂：

甲醇

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按丹皮酚峰计算应不低于3500。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇+水=70+30

2.2检测波长：274nm

2.3柱温：室温

试样制备：

1. 称取供试品

取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取约0.3g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取约0.4g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1mL含20mg溶液。

3. 供试品溶液的制备

供试品，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤：

  分别精密吸取对照品溶液10mL和供试品溶液20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长274nm处测定丹皮酚（C₉H₁₀O₃）的峰面积，计算出其含量。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p401。