常春藤提取物常春藤苷C的含量测定-上禾生物 |
发布时间:2021-10-28 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:669 |
常春藤苷C其叶提取物中的常春藤苷C具有优秀的祛痰,解痉等作用,在临床上已经用于治疗呼吸道疾病,其已成为人们重视的天然活性成分,具有很大的药用价值和市场前景。 含量测定[3]1色谱条件 Agilent1200高效液相色谱仪;Thermo Hypersil BDS C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(28∶72);流速:0.8mL·min-1,柱温:35℃,检测波长:201nm。 2对照品溶液的制备 取常春藤皂苷C对照品适量,加50%乙醇水制成每1mL含0.1mg的溶液,作为对照品溶液。 3供试品溶液的制备 取适量朝鲜白头翁药材,粉碎,过3号筛,精密称定,称取1g于具塞锥形瓶中,向其加入50%乙醇水溶液50mL,称定重量,加热回流1h,放冷,再称定重量,用50%乙醇水补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液5mL置25mL量瓶中,加50%乙醇水定容至刻度,即得供试品溶液。 4方法学考察 4.1空白对照试验 取50%乙醇水作为空白对照溶液,按1项下色谱条件进行测定分析,结果显示,空白对照溶液在与常春藤皂苷C对照品色谱峰保留时间处无色谱峰,表明溶剂对测定没有干扰(见图1、2)。
4.2线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液2、4、8、12、16、20μL注入色谱仪,按1项下色谱条件进行测定,以常春藤皂苷C的含量(μg)和相应的峰面积进行线性回归,计算得回归方程Y=364.5341X-1.3262,r=0.9999,结果表明常春藤皂苷C在0.220~2.203μg线性关系良好。 4.3精密度试验 精密吸取同一份供试品溶液(S4),按1项下色谱条件连续进样6次,记录峰 面积。结果显示,供试品色谱峰峰面积的RSD=0.48%,表明仪器的精密度良好。 4.4稳定性试验 精密吸取3项下的供试品溶液(S4),按1项下色谱条件分别于0、6、8、12、 18、24h进样,记录峰面积。结果显示常春藤皂苷C色谱峰峰面积的RSD=0.11%,表明供试品溶液中常春藤皂苷C在24h内稳定性良好。 4.5重复性试验 取3项下的供试品溶液(S4)6份,分别照1项下方法测定,记录峰面积。结果显示常春藤皂苷C峰面积的RSD=1.44%,表明此方法的重复性良好 4.6回收率试验 分别精密称取样品(S4)1g,共6份,分别加入常春藤皂苷C对照品适量,按2项下方法制备,按1项下色谱条件进行测定,计算常春藤皂苷C的回收率。结果见表2。
4.7耐用性试验 实验中选取了不同厂家色谱柱(ThermoHypersilBDSC18、PhenomenexGemini C18、VenusilXDP C18)及不同厂家和型号的高效液相色谱仪(Agilent1290、岛津LC-20A、WatersE2695)测定各供试品,结果显示不同厂家色谱柱和不同仪器均 能对样品进行较好分离,适用性良好。 5样品测定 分别取不同产地的18批朝鲜白头翁药材,按3项下的方法制备供试品溶液,照1项下色谱条件进样,记录色谱图,计算含量,结果见表3、图3。
由表3可以看出,18批朝鲜白头翁中常春藤皂苷C含量测定结果为0.806%~4.317%,差异较大,其中,采集于延吉市依兰镇台岩村的朝鲜白头翁(S3)中常春藤皂苷C含量最高,为4.317%;而采集于通化县东来乡的样品(S15)中常春藤皂苷C含量最低,仅为0.806%。 主要参考资料[1][中国发明,中国发明授权]CN201310618958.2从常春藤叶中分离常春藤苷C及苷元的方法 [2][中国发明,中国发明授权]CN200710034341.0一种从常春藤中制备常春藤苷C的方法
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