金银花叶提取物的抗氧化作用研究

摘要 用β-胡萝卜素漂白法、POV 测定法和过氧化氯氧化法分别考察了金银花叶提取物的抗氧化作用。结果表明，绿原酸粗提物和粗黄酮对油脂的过氧化反应均有显著的抑制作用；两者的氧化还原容量分别是化学合成抗氧化剂BHA的2.0和2.8倍。

关键词 绿原酸粗提物 粗黄酮 抗氧化活性  上禾生物

金银花叶是生产金银花的副产品，其产量约是花的1O倍左右。现已证实，它所含有的药理活性物质与花相近或高于花[1]，其中绿原酸和黄酮类物质都有一定的抗菌消炎作用[2]，而且又易于氧化，故应是很好的抗氧化活性材料。所以我们对金银花叶提取物的抗氧化活性进行了考察，以便为其开发提供理论依据。

1 材料与仪器

样品：采自河南封丘黄陵，系5月底第一次采花后被修剪下的忍冬叶。

试剂：丁基羟基茴香醚(BHA)(省食品所提供)，β-胡萝卜素(市售，生化级)，豆油(市售)，碘化钾(AR)，双氧水和硫代硫酸钠等。

仪器：恒温培养箱(厦门医疗电子仪器厂)，永停滴定仪。

2 方法与结果

2．1 样品处理

取500g粉碎后的干燥样品，用6O℃温水浸提2次，第1次2h，第2次1h 合并滤液，浓缩，得粗提物，记为E。取一部分E，用乙酸乙酯分出粗黄酮(记为E1 )后，母液按文献[1]方法分离绿原酸粗品(记为E 2)，经测定，绿原酸含量为68．2 %。

2．2β-胡萝卜素漂白法

参照文献[3]方法制备琼脂板。取E、E₁、E₂ 各2mg，分别用2mL95%乙醇溶解。依照文献[3]方法依次加上述溶液，以95%乙醇做空白对照。将加样后的琼脂板置阳光下晒，观察记录胡萝h素被漂白的时间(rain)。

按下式计算试样的抗氧指数A₁ ：

测定结果，粗提物(E)、黄酮(E₁)、绿原酸(E ₂)的A 值分别为3．0、8．6和7．2。

2．3 POV 测定法

2．3．1 供试品处理

取5个具塞三角瓶，各加lOg豆油，编号。将1、2、3、4号按0．02 %的比例分别加

BHA、E、E₁和E₂ ，混匀，5号做空白对照。

2．3．2 过氧化值测定

从上述1～5号三角瓶中准确称取1g样品，分别置于5个碘量瓶中，各加入25mL氯

仿一冰乙酸(2：3)混合溶液，再加入1mL饱和碘化钾，密塞，摇匀，避光放置30min。然后

各加入 50ml蒸馏水，以淀粉做指示剂，用0.01mol／LNa 2S 2O 3标准溶液滴定至终点。记

录消耗的Na2S2O3体积V ，按下式计算过氧化值POV。

式中：N，Na2S2O3的浓度，mol／L；G，取样质量，g。

2．3．3 样品培育

将上述测定过过氧化值的剩余试样，置于45℃ 士1 C或60 C士1℃ 的恒温箱中培育。

以后每天测一次过氧化值，结果如图所示。

2．4 氧化还原容量分析

2．4．1 原理

绿原酸或黄酮类化台物都具有可氧化性，由此推测它们的抗氧化性能—— 即对脂质过氧化反应的抑制作用，是通过自身的氧化来实现的。为进一步了解这两类物质的抗氧化能力，我们叉采用过氧化氢氧化法进行了考察。原理如下：

根据消耗的Na2S2O3标准溶液的量，可推算出抗氧化物(绿原酸或黄酮)与过氧化氢

相当的量。

2．4．2 方法

准确称取0．1g E1或E2，用乙醇溶解后，用蒸馏水稀释至100mL作为测试液待用。吸取10mL 测试液，加人lmL 球醋酸和0．2mol／L H2O25mL，反应20min后加人5mL

饱和KI溶液，静置片刻，然后用永停滴定法以Na2S2O3滴定至终点。同时做空白实验，按

下式计算抗氧化值(单位：meq／g)：

抗氧化值=(V空一V样)*N *100

式中：V空，空白样消耗Na2S2O3的体积，mL；V样，样品消耗Na2S2O3的体积，mL；N，Na2S2O3的浓度，mol／L。

同样方法测定食用抗氧化剂BHA 的抗氧化值，并于E1和E2的值相比较，求得E1和E2相对于BHA 的抗氧化倍数分别为2．8和2．0。

3 讨论

3．1 POV 法测定显示，粗黄酮和绿原酸粗品对油脂的过氧化反应的抑制作用与化学合

成品BHA相当。

3．2 过氧化氢氧化实验显示，粗黄酮、绿原酸粗品的抗氧化能力分别是BHA 的2．8倍

和2．2倍。两种方法测定结果的差异，可能是因E1和E2在油脂中的溶解性能较差所致。

3．3 绿原酸和黄酮类化台物不仅具有较强防腐作用[2]，而且又具有较强的抗氧化作用，同时还具有一定的药理活性。这为金银花叶中药用成分的提取和利用提供了理论依据。

参考文献

l 武雪芬等．金银花越冬者叶有效成分测定．中药材，1997，20（1）：6～7．8

2宋广运等．忍冬不同器官的绿原酸含量及体外抑菌效果．中药材，1985，16(5)：37~38．

3 武雪芬等．楮叶提取糖抗氧化活性初探．河南科学，1995，13(2)：112～ 113．