绿原酸的理化鉴别及含量测定

关键词：绿原酸、理化鉴别、含量测定

绿原酸理化性质介绍：绿原酸半水合物为白色或微黄色针状结晶，在110℃时变为无水物，与稀盐酸共热产生咖啡酸，熔点208℃，比旋光度[α]D=35 2°(C=28)。绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸形成的酯，其分子结构中有酯键、不饱和双键及多元酚三个不稳定部分。在从植物提取过程中，往往通过水解和分子内酯基迁移而发生异构化。由于绿原酸的特殊结构，决定了其可以利用乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂从植物中提取出来，但是由于绿原酸本身的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热。绿原酸的供试液放置于棕色瓶、冰箱（2℃）保存时最为稳

定。

绿原酸理化鉴别：取该品粉末0.2g，加甲醇 5ml，放置12小时，滤过，滤液作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每 1ml含 1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取供试品溶液10～20μl，对照品溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｈ薄层板上，以醋酸丁酯－甲酸－水（7：2.5：2.5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm） 下检视。 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

绿原酸含量测定： 照高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定。

色谱条件与系统适用性试验： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.4%磷酸溶液（13：87）为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算不低于1000。

对照品溶液的制备： 精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含4μg的溶液，即得（10℃以下保存）。供试品溶液的制备 取本品粉末约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50%甲 醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 该品含绿原酸（C16H18O9）不得少于1.5%。

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