绿茶提取物EGCG的分离纯化研究
随着人们对EGCG研究的深入,以及EGCG许多药理作用被进一步证实,分离制备EGCG单体纯品已经成为深入研究与应用的需要。近年来,国内外有许多关于提纯制备EGCG的研究,利用了许多新兴分离、制备方法,但主要还是以色谱分离为主。原理是利用儿茶素各单体之间的性质差异,选择不同的吸/脱附剂,使之得到分离 [2] 。
柱色谱
以绿茶萃取物为原料,直接上填料柱,选用合适的洗脱剂进行等度或梯度洗脱,并定性收集无交叉的流份,从而得到EGCG纯品。
将茶多酚上硅胶柱后,用醋酸乙酯一甲苯进行梯度洗脱,对洗脱成分每隔2 h取样一次,进行薄层色谱分离,FeCl。显色,定性收集无交叉成分的洗脱样品,进行准确减压蒸馏,干燥,分离可得到EGCG、ECG、EC 3种几茶素单体,质量分数分别为98.7%、99.2%、98。6%,且其中EGCG占茶多酚质量分数为51.6%。
柱色谱预分离
制备型HPLC提纯:以绿茶提取物为原料,经柱色谱除去杂质,并将儿茶素中几种单体预分离为几个组分后,再用制备型HPLC分离其中含EGCG的组分,可得到EGCG纯品。
有机溶剂富集
柱色谱纯化:以绿茶提取物或茶多酚为原料,经有机溶剂多次萃取,除去杂质,提高儿茶素总纯度后,再用柱色谱法分离可得EGCG单体。
高效液相色谱法
以儿茶素粗品为原料,选择、优化出合适的柱操作条件,直接用HPLC分离出儿茶素单体。钟世安等以粗几茶素粉末为原料,采用反相高效液相色谱技术,收集相应的馏份,再经P一1大孔树脂,旋转蒸发浓缩洗脱液,冷冻干燥后,得到EGCG、GCG、ECG3种酯型儿茶素单体。
制备型高效逆流色谱法
是一种较新型的液一液分配技术,于1982年由Ito首创,并在1994年将其改进后,进样量增大,能够分离克量级的样品。
沉淀一吸附法
利用儿茶素能与某些金属形成金属盐沉淀,再用酸将其沉淀溶解,最后用柱色谱法除杂质,可得到酯型儿茶素的单体。
超临界流体萃取
超临界流体萃取技术是近20年才发展起来的新型分离技术。宓晓黎等以茶叶为原料,以甲醇为改性剂在CO2的超临界压力和温度条件下进行萃取,对改性剂、超临界流体性质、静态萃取时间和动态萃取流体CO2的量对萃取率的影响分别作了考察,确定了最佳萃取条件。对将超临界流体萃取法应用于制备EGCG的工业化作了有益的探索。
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