五香止痛散质量标准研究 | 五香止痛散质量标准研究 |
| 发布时间:2020-05-31 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:687 |
探讨五香止痛散的质量标准。 方法采用薄层色谱法对该方中的厚朴、木香与丁香进行鉴别；采用双波长锯齿扫描法测定方中厚朴酚的含量。 结果薄层色谱鉴别可检出样品中对应薄层斑点，用薄层扫描法可测定出厚朴酚的含量。 结论用该方法作定性鉴别简便、快速、专属性强，可有效控制制剂的质量。 【关键词】 五香止痛散 厚朴 木香 丁香 薄层色谱 五香止痛散由厚朴、木香、丁香等中药组成。具有理气止痛的作用，临床上用于治疗小儿腹胀、腹痛等疗效显著。为了控制该制剂质量，采用薄层色谱法对厚朴、木香、丁香进行鉴别，采用双波长锯齿扫描法测定方中厚朴酚的含量，为五香止痛散的质量标准提供定性定量的检测方法。 1 仪器和试药 1.1 仪器 tg328b型电光分析天平， cs-930型薄层扫描仪（日本岛津），微量进样器。 1.2 试药和供试品薄层层析用硅胶g（青岛海洋化工厂），所用试剂均为分析纯。对照品：厚朴酚、和厚朴酚（批号分别是110729-200309， 730-8702），木香对照药材（批号120921-200405），丁香酚（批号0725-200008），购于中国药品生物制品检定所。五香止痛散由河北保定中医院提供（批号040812-1，041011-1，041102-1），阴性对照按处方及制备工艺分别不加厚朴、木香、丁香制成。 2 方法与结果 2.1 鉴别 2.1.1 厚朴的薄层鉴别取本品10 g，加醋酸乙酯30 ml，加热回流30 min，放冷，滤过，滤液用2%氢氧化钠溶液提取3次，20 ml/次。合并碱液，加盐酸调节ph值至1～2，用三氯甲烷提取3次，20 ml/次。合并三氯甲烷液，水洗 ，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水后，80℃水浴上蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取厚朴酚、和厚朴酚对照品，加甲醇制成每毫升各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法［1］实验,吸取上述供试品溶液20 μl，对照品溶液5 μl，分别点于同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶gf254薄层板上，以苯一醋酸乙酯（6∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果见图1。 2.1.2 木香的薄层鉴别［1］取本品10 g，加乙醚40 ml，浸渍4 h，时时振摇，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.5 g，加乙醚10 ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法［1］实验，吸取上述供试品溶液5～10 μl，对照药材溶液4 μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以环己烷—丙酮（10∶3）为展开剂。展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一相同的蓝紫色斑点。结果见图2。 2.1.3 丁香的薄层鉴别取本品6 g，加乙醚40 ml，冷浸1 h，滤过，挥去乙醚，残渣 加乙醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取丁香酚对照品，加乙醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法［1］实验，吸取上述两种溶液各1～2 μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以苯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果见图3。 2.2 厚朴酚的含量测定 2.2.1 供试液的制备精密称取本品10 g，加醋酸乙酯30 ml，加热回流30 min，放冷，滤过，滤液用2%氢氧化钠溶液提取3次，20 ml/次，合并碱液，加盐酸调节ph值至1～2，用三氯甲烷提取3次，20 ml/次，合并三氯甲烷液，水洗 ，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水后，80℃水浴上蒸干，残渣加甲醇1 ml溶解定容，取上清液作为供试品溶液。 2.2.2 厚朴酚对照品溶液的制备称取厚朴酚对照品用甲醇溶解制成对照品溶液0.5 mg/ml备用。 2.2.3 扫描条件［2］双波长反射法锯齿扫描，参比波长λr=260 nm，测定波长λs=290 nm，sx=3。 2.2.4 线性关系将厚朴酚对照液1，2，3，4，5，6 μl点于cmc-na做粘合剂的硅胶gf254预制板上，按定性实验中层析条件展开，进行扫描测定,峰面积和点样量线性方程为y=2 987.23+798.64x,r=0.999 4,线性范围为0.3～3.6 μg。 2.2.5 稳定性和精密度实验对同一薄层板上同一斑点依法每隔30 min扫描1次，共测定4 h，计算rsd=2.77，说明本实验条件下4 h内测定样品稳定。对同一薄层板上同一斑点连续扫描7次，测得峰面积值，计算rsd=2.35%.说明仪器精密度良好。 2.2.6 样品含量测定精密吸取样品溶液10 μl，及厚朴酚对照液2，4 μl，交叉点于同一cmc-na硅胶g薄层板上依法展开扫描测定。分别测定3批样品。测定结果见表1。表1 样品的厚朴酚含量测定结果（略） 2.2.7 加样回收率测定取已知含量的样品7份，精密测定，精密填加不同量的厚朴酚对照品适量，按含量测定项操作，计算回收率，结果平均回收率为96.37%，rsd=1.66%(n=5)。 3 讨论 除上述3项鉴别外，还参照《中国药典》2000年版ⅰ部等资料对制剂中陈皮进行了薄层色谱鉴别，采用橙皮苷对照药材对照，结果由于分离效果不十分理想，斑点不清晰突出，不能说明问题，故未列入正文。 五香止痛散是由厚朴、丁香、木香等16味中药组成的复方制剂，成分较为复杂，这给提取分离及薄层测定均带来一定困难。为了能有效地从产品中分离出厚朴有效成分厚朴酚进行薄层测定，我们根据厚朴酚的性质对提取溶剂进行反复研究、实验，最后选用乙酸乙酯作为提取溶剂。经硅胶gf254薄层层析后，获得满意的结果。薄层扫描测定的回收率和重现性也良好。
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