杜仲及杜仲提取物药理作用研究进展

1.中枢镇静作用。

取18-22g小白鼠，雌雄不拘，随机分成3组，顺次放入与药理生理多用仪相连的测试盒内，记录鼠活动次数。给药前先测试5分钟的活动次数，然后分别以杜仲皮、叶煎剂及生理盐水灌胃，于1、2、3h测试5分钟内活动次数，并与给药前比较：杜仲皮煎剂15g／kg、杜仲叶煎20g／kg灌胃后，在3个不同测试时间内，小白鼠活动次数均显着减少(P＜0.01)；生理盐水0.1ml／kg灌胃，小白鼠活动次数无明显减少(P＞0.05)，见表3。

杜仲提取物绿原酸--上禾生物  073184213302

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2.对免疫功能的影响：。

2.1.对细胞免疫功能的影响：。

2.1.1.对DNCB(2，4-二硝基氯苯)所致小鼠迟发型超敏反应的影响：昆明种小鼠，体重18-22g，分成六组，每组25只，药物组灌胃杜仲液(10ml／kg／d)共10次，对照组分别灌胃去离子水和间日皮下注射环磷酰胺(30mg／kg／d)共3次。空白和药物组在给药第3天，环磷酰胺组在给药后第2天皮下注射7%DNCB丙酮溶液(0.02ml／只)致敏，间隔2天同剂量再致敏1次，于第一次致敏后第10天，用1%DNCB丙酮液0.02ml，涂布左耳攻击，右耳作对照，24小时后处死动物，煎取两耳称重，以两耳重量之差值进行统计处理。两次结果一致。表明灌胃杜仲皮、叶、枝、再生皮均能抑制DNCB所致小鼠的迟发型超敏反应。

2.1.2.对小鼠外周血液中T细胞百分比的影响：动物分组，每组10只，药物组分别按10ml／kg体重灌胃药物，对照组给以同体积去离子水，连续8次，于末次给药后lh鼠尾取血涂片，孵育、染色、镜检，每只动物血片标本均查100个淋巴细胞，计算T和B淋巴细胞的百分比。结果杜仲对正常小鼠T淋巴细胞百分比均未见有影响。用同样方法，除空白组外，其余各组小鼠在给药的同时均皮下注射氢化可的松40mg／kg，测定药物并用氢化可的松对外周血中T细胞百分比的影响。由于氢化可的松抑制细胞免疫，使T细胞百分比与空白组比较明显降低(P＜0.001)，但服用黄芪和杜仲各组的T细胞百分比与正常组比较均无明显差别(P＞0.05)，而与氢化可的松组比较侧均有非常显着的差异(P＜0.001)，表明杜仲同黄芪一样，能对抗氢化可的松免疫抑制作用，具有调节细胞免疫平衡的功能。动物分组，每组10只，除空白组外，各组动物均分别在前腋下移植民S180细胞悬液(l：3)0.2ml，4天后开始灌胃药液(20ml／kg.d)，连续8天，空白和带瘤对照组灌胃同体积去离子水，于末次给药后lh，取血同前法制作血片，镜检。荷瘤动物的细胞免疫水平比正常动物低下，两者T细胞百分比有显着差别(P＜0.05)，而服用杜仲各组的荷瘤动物的T细胞百分比明显回升，与正常动物组比较无显着差异(P＞0.05)，与未服药的荷瘤动物组比较则有显着差别(P＜0.05)，重复一次实验，结果一致，表明杜仲叶、皮、枝、再生皮均有增强荷瘤小鼠细胞免疫功能的作用。但药物各组的肿瘤重量与带瘤对照组比较未见明显差别(P＞0.05)。

2.对体液免疫功能的影响：。

2.1.对小鼠血清溶血素形成的影响小鼠依窝别、性别、体重均分于各组，连续给杜仲水煎剂10ml／kg／d灌胃8天后，眼眶取血测定HC50，结果空白组、药物组的HC50分别为179.91，162.24，两组间无显着差别(P＞0.05)，环磷酰胺组于致敏当天一次肌肉注射(20mg／kg体重)的HC50为96.43，非常显着的抑制正常小鼠血清溶血素的形成。以环磷酰胺20mg／kg体重于致敏的前一天、同天和间隔l天共3次颈部皮下注射造成小鼠溶血素形成低下。上述小鼠给予杜仲水煎剂10ml／(kg.d)10天，取血测定HC50。结果空白组、环磷酰胺对照组和药物组的HC50分别为242.83、34.04和29.460表明杜仲对环磷酰胺所致血清溶血素形成低下小鼠无明显影响(P＞0.05)。

2.2.2.对天花粉所致小鼠速发型超敏反应的影响以天花粉0.1mg／每鼠和0.2mg／每鼠间日颈部皮下注射致敏共2次。于致敏前一天开始给小鼠灌胃杜仲水煎剂10ml/kg，每天1次，连续5天后改为间日给药1次，共给药10次。另以天花粉50mg／每鼠(溶于5%氢氧化铝液内)一次腹腔注射致敏，并同时按上法给药，共给药9次。实验于致敏后第15天每鼠静脉注射天花粉0.3mg攻击，记录动物死亡数。结果杜仲对天花粉可致小鼠速发型超敏反应均未见明显影响(P＞0.05)。

2.2.3.对蛋清所致豚鼠过敏性休克的影响：按邓文龙方法，给药方法同上述天花粉实验不加致敏后第15天进行攻击。结果杜仲对蛋清所致豚鼠过敏性休克无保护作用(P＞0.05)。

2.3.对非特异性免疫功能的影响：。

2.3.1.对小鼠血中炭末廊清率的影响小白鼠100只，体重25-28g，雌雄并用。均分为药物组和对照组。药物组按6g／kg，每天口服杜仲水煎剂1次，连续6天。对照组分别口服同容积常水和党参一黄芪煎剂(各3g／kg)。于末次给药后24小时，各组小鼠分别由尾静脉注射印度墨汁0.2ml，注射后2分钟和20分钟分别从眶静脉取血25ul，吸洗至0.1%Na2CO2，2ml溶液中，摇匀，用72型分光光度计测定650mm的光密度，按公式计算吞噬指数K，K=(logC1-logC2)/(T2-T1)，式中C1为2分钟(T1)血样的光密度，C2为20分钟(T2)血样的光密度。K值与小鼠网状内皮系统吞噬功能成正比。可见杜仲皮、叶、枝、再生皮及党参-黄芪组的吞噬指数增大，与常水组比较相差显着，P＜0.05或0.001，表明它们能激活单核巨噬细胞系统的吞噬活血，提高小鼠网状内皮系统的吞噬功能。

2.3.2.对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响：小白鼠129只，分两批进行试验。药物组按12g／kg，每天口服杜仲水煎剂1次，连续6天，对照组分别口服同容积生理盐水和党参-黄芪煎剂(各6g／kg)，各组于给药6天后分别腹腔注射鲜牛肉汤1ml／只，24小时后再腹腔注射2%鸡红细胞生理盐水悬浮液0.5ml，40分钟后处死动物，取腹腔炎性渗出物涂片，瑞氏染色，镜检，计算吞噬百分率和吞噬指数(两批实验结果一致，合并计算)。杜仲皮、叶、枝、再生皮的吞噬百分率和吞噬指数显着增大，表明杜仲具有增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用。小鼠168只，分两批实验，方法同前，只是从第3天给药起，除空白组外，各组小鼠每天分别再肌肉注射氢化可的松20mg／kg，连续给药3天。两批实验结果一致，并计算见表9。可见由于氢化可的松的抑制巨噬细胞对抗原的处理和摄取，使氢化可的松组的吞噬百分率和吞噬指数非常显着减少、而杜仲皮、叶、枝和再生皮组的吞噬百分率和吞噬指数比生理盐水+氢化可的松组非常显着增高。而且其值比空白生理盐水组还大。表明杜仲能调整机体的免疫功能，对抗氢化可的松的免疫抑制作用。动物分组、每组10只，除空白组外，各组动物均分别右前腋下移植S180细胞悬液(l：3)0.2ml，并分别开始口服杜仲水煎剂(12ml／kg／d)，连续12次，对照组灌服同体积去离子水，于末次给药后24小时按上法测定腹腔噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞功能与正常动物组比较明显降低，其吞噬百分率和吞噬指数显着减少(P＜0.01)。但服用杜仲的荷瘤小鼠无论是吞噬百分率和吞噬指数与带瘤对照组比较，均明显升高(P＜0.001或0.01)，并使之恢复到正常水平，表明杜仲皮、叶、枝、再生皮有增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用。

3.对垂体-肾上腺皮质系统功能的影响：。

3.1.对大鼠蛋白性足肿胀的影响：大鼠60只，体重115-170g，按体重和性别均分为药物组和对照组。药物组按6g／kg／d，口服给予醇沉杜仲水煎液，连续给药8天，对照组予生理盐水。用容积法测量鼠足肿胀值；结果致炎3小时后，服用杜仲皮、叶、再生皮组的鼠足肿胀值减小，与对照组比较，相差显着(P＜0.05)，但杜仲枝的作用则不明显(P＜0.05)。

3.2.对大鼠外周血液中嗜酸性粒细胞的影响：大鼠96只，体重为50-80g，按体重和性别均匀分组。药物组按6g／kg／d，分别口服给予杜仲皮、叶、枝、再生皮水煎剂，连续给药6天，另用口服同体积生理盐水，并于实验前4小时肌注醋酸可的松50mg／kg作对照。用直接计数法测定大鼠外周血中嗜酸性粒细胞数，分别与各自给药前测定2天的平均正常值比较，计算嗜酸性粒细胞降低百分率。可见杜仲皮、叶、枝、再生皮和醋酸可的松一样能使大鼠外周血液中嗜酸性粒细胞减少。另用95只摘除肾上腺大鼠，同上服药后，杜仲各组大鼠的外周血液中嗜酸性粒细胞未见减少，鼠生存期亦未见有延长。两相比较说明杜仲的作用依赖于肾上腺的存在。

3.3.对小鼠外周血液中淋巴细胞的影响：小鼠170只。体重18-22g，均匀分组，分二批进行实验，按10g／kg／d口服给予杜仲皮、叶、枝、再生皮水煎剂，连续给药5天，另用口服生理盐水和肌注氢化可的松(20mg/kg)组作对照，鼠尾部取血涂片，记录每100个白细胞中的淋巴细胞数。两批实验结果一致，合并计算。可见杜仲皮、叶、枝、再生皮均可使小鼠血中淋巴细胞百分率降低，与生理盐水组比较相差非常显着(P＜0.001)，与氢化可的松组比较相差则不显着(P＜0.05)，表明杜仲(皮、叶、枝和再生皮)和氢化可的松一样均具有使小鼠血中淋巴细胞减少的作用。

3.4.对糖代谢的影响：。

3.4.1.对小鼠肝糖元的影响雄性小鼠122只，体重25-30g，均匀分组，分2批进行实验，药物组按10g／kg给予杜仲皮、叶、枝、再生皮水煎剂，连续给药8次，另用口服常水和肌注氢化可的松40mg／kg(末两天注射)组作对照。实验各组小鼠停食14小时后，每鼠口服葡萄糖(10g/kg)，3小时后处死动物，取肝脏测定肝糖元。两批实验结果趋势一致，合并计算，可见，杜仲皮、叶、枝、再生皮和氢化可的松一样均使小鼠肝糖元含量增高，与常用组比较，相差非常显着(P＜0.001)。表明杜仲有促进肝糖元堆积的作用。

3.4.2.对小鼠血糖的影响小鼠130只，体重25-27g，均匀分组。分二批进行实验，药物按10g／kg次，每日口服给药2次，连续给药9次。另用口服常水和肌肉注射氢化可的松30mg／kg(实验前2小时注射)组作对照，实验前24小时各组动物禁食，于末次给药后2小时取血浆测定血糖，两批实验趋势一致，合并计算。可见杜仲皮、叶、枝、再生皮和氢化可的松一样均使小鼠血糖含量增高。与常水组比较相差非常显着(P＜0.01或0.001)。表明杜仲皮、叶、枝、再生皮均有使血糖增高的作用。

3.5.对幼年小鼠胸腺的影响：仿AC-TH生物检定法，将体重8-l1g断乳的幼年小鼠，按窝别和体重，随机分组。药物分10g／(kg.d)和20g／(kg.d)两个剂量进行实验，皮下注射给药，连续给药5天。另用皮下注射同体积生理盐水和ACTH0.5单位／只鼠(末3次每天注射1次)作对照，将鼠处死，称重，取胸腺准确称量(I0.5mg)，计算每100g体重的胸腺重量(mg)的平方根值。可见在剂量为10g／kg时，杜仲皮和ACTH组的小鼠胸腺萎缩，与生理盐水组比较相差显着(P＜0.05)，而枝叶则不明显(P＞0.05)；但当剂量增加为20g／kg，杜仲皮、叶、枝、再生皮，均使小鼠胸腺显着萎缩(P＜0.01或0.001)，表明杜仲与ACTH同样具有使小鼠胸腺萎缩的作用。但枝、叶剂量要大。

3.6.对大鼠肾上腺中维生素C含量的影响：体重60-90g的雄性大鼠37只，均匀分组，药理组按10g／(kg·d)口服给药，连续给药8天。另用口服生理盐水组作对照。动物断头处死，取肾上腺测定其中维生素C含量。实验结果杜仲皮、叶、枝组大鼠肾上腺中维生素C含量与生理盐水组比较，虽有降低，但无显着差异(P＞0.05)。

3.7.对大鼠血浆皮质醇的影响:大鼠69只，均匀分组。药物组按10g／kg，每日口服给药2次，连续给药8天。另用口服常水和肌肉注射醋酸可的松(实验前4小时肌注50mg／kg)和皮下注射ACTH组(实验前3小时皮下注射2单位／100g)对照。于末次给药后1小时将鼠断头处死，收集血液，离心取血浆测定皮质醇含量。可见杜仲皮、叶、枝、再生皮和ACTH一样，能使大鼠血浆皮质醇含量增加，与常水组比较，差异非常显着(P＜0.01或(0.001)。表明杜仲使皮质醇分泌增加，并释放入血液中。

4.抗肿瘤作用：制备红杜仲的水提醇沉液A及注射液B，按照筛选规程对此两制剂进行体内抗肿瘤试验。制剂A对小鼠S180实体瘤的生长有明显抑制，经3次实验重复有效，抑制率31-52%。对小鼠U14实体瘤的生长也有抑制作用。制剂B对民S180实体瘤的作用不稳定，三次实验仅一次抑制率为45%，制剂B为制剂A除去鞣质后所得制剂，因此可推测制剂A的抗肿瘤作用可能为鞣质或与明胶一起结合或沉淀的物质所致。

5.抗炎作用：给大鼠灌胃或皮下注射红杜仲注射液400g(原生药)／kg后，能减轻蛋清所致的足肿胀。皮下注射给药作用强于灌胃给药。在前2小时的作用比25mg／kg的氢化考的松的作用强，以后作用相当，均能维持6小时以上。皮下注射200g(原生药)／kg红社仲注射液也能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高，腹腔冲洗液的光密度为0.116±0.055，与对照组0.212±0.047相比显着为低(P＜0.01)。

6.降压作用：实验动物兔(2.5-3.2kg)7只，狗(15kg)2只，雌雄兼用。动物麻醉后，按常规方法分离颈总动脉及气管并插管，联接于水银检压计，用JL-3三道生理记录仪记录其血压及呼吸。以100%生杜仲、炒杜仲和砂烫杜仲的水煎剂分别由颈静脉给药，剂量为1ml／kg。3种杜仲水煎剂对家兔和狗都有明显的降压作用，但生杜仲降压作用较弱，炒杜仲炭和砂烫杜仲的作用几乎完全相同，其降压的绝对值数相当于生杜仲的两倍。

7.对子宫的抑制作用：将150-220g的雌性大白鼠猛击头部致死后，立即取出子宫分叉处外的一段，洗去血液，悬挂于YSD-离体器官测定仪上、营养液为洛氏液，调节恒温至31℃±0.2℃，通入空气，在10ml营养液中加入100%杜仲水煎液0.5ml，保证给药、记录时间的一致性，记录3种不同杜仲样品对子宫的影响和对抗垂体后叶素的作用。结果见表20，可见3种杜仲均能显着抑制大白鼠离体子宫的自发活动，降低其频率。同时，还可见到其收缩强度降低。另外，3种杜仲均能对抗垂体后叶素对离体子宫的作用。另盐炙杜仲对中孕小白鼠离体子宫自主收缩的抑制作用增强。

8.强壮作用：。

8.1.对动物活动能力的影响：取体重22±2g的小白鼠，雌雄不拘，随机分成给药组和对照组，按小白鼠游泳法进行抗疲劳试验。实验时，置小白鼠于水温28℃±1℃、容积为64×34×40cm的游泳槽内，测试鼠沉入水面下7秒所需时间。结果自饮组：7天组(n=22)和14天组(n=18)，自饮100%杜仲皮和150%杜仲叶煎剂，并与对照组比较，游泳时间差异无显着意义(P＞0.05)。给药组：21天组给予杜仲皮煎剂15g／kg，杜仲叶煎剂20g／kg灌胃，并与常水对照组相比，皮煎剂组差异有显着意义(P＜0.05)，叶煎剂组差异无显着性意义(P＞0.05)。

8.2.对动物抵抗能力的影响：。

8.2.1.小白鼠抗冻实验:取体重22±2g的小白鼠，雌雄不拘，随机分成给药组和对照组，实验前禁食10小时，分别给以杜仲皮、叶煎剂及叶冲剂，以常水对照，按性别将体重相近的小白鼠，每2只置于同一铁笼中，放入-3℃的冰箱中，测试动物生存时间(X±SD)。结果：自饮30天：10%杜仲皮煎剂组小白鼠生存时间为242.0±74.0分钟(n=14)；10%杜仲叶煎剂组为249.0±59.0分钟(n=20)；常水对照组为175.0±58分钟(n=17)。用药组和对照组之间有显着差异(P＜0.01)。自饮28天，20%杜仲叶冲剂组生存时间为261.0±41.0分钟(n=7)，常水对照组为174.0±53分钟(n=14)，两组差异有显着意义(P＜0.05)。

8.2.2.小白鼠耐缺氧实验小白鼠分别给予杜仲皮煎剂和杜仲时冲剂，以生理盐水或常水对照，受试鼠以只为单位，放入容量为250ml的广口瓶内，瓶口涂凡士林密封，测试动物在瓶内的成活时间(X±SD)。结果：100%杜仲皮煎剂10g／kg灌胃组，小白鼠成活时间为46.0±12.0分钟(n＝7)，生理盐水0.1ml／kg组为32.0±12.0分钟(n=9)，两组差异有显着意义(P＜0.05)；20%杜仲叶冲剂自饮28天组，小白鼠成活时间为34.0±6.0分钟(n=7)，常水对照组为27.0±5.0分钟(n＝11)，两组差异有显着意义(P＜0.05)。

9.对血浆cAMP和cGMP含量的影响：昆明种小鼠，按窝别、性别和体重，每2只为1对，均分对照组和实验组，每给10对。按10ml／kg体重灌胃杜仲醇沉水煎液，对照组予等量去离子水，每天组药1次，连续5天，于末次给药后1h，断头取血，以每一对2只动物血样合为1个样本，用放射免疫法测定血浆中cAMP和cGMP含量、结果对照组cAMP含量为70.88±4.53(X±SE下同)，杜仲皮组cAMP含量为100.39±15.45(P＜0.05)；cGMP含量，对照组为54.50±16.42，杜仲皮组137·84±25.08(P＜0.05)，表明杜仲可同时使血浆中cAMP和cGMP含量升高，显示杜仲对环核苷酸代谢有调节作用。同时实验证明杜仲叶、枝、再生皮亦可引起血浆中cAMP和cGMP含量升高。杜仲及杜仲提取物药理作用研究进展

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